呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条的研制的中期报告.docx

呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条的研制的中期报告
一、研究背景
近年来，快速、灵敏、简便、准确的检测方法在医学、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用。其中，免疫层析试纸条因其操作简便、快速、可定量检测等特点，成为一种广泛应用的生物分析技术。
呋喃唑酮是一种广谱性杀菌药物，常用于动物以及人类的治疗。然而，长期使用呋喃唑酮可能导致药物代谢物在人体内部留存，并对人体健康造成潜在的威胁。因此，建立一种快速、准确、可靠的呋喃唑酮代谢物检测方法成为当务之急。
本研究旨在基于胶体金免疫层析试纸条技术，建立一种检测呋喃唑酮代谢物的快速、准确、高通量的检测方法。
二、研究目的
本研究的目的是：
1.利用胶体金免疫层析试纸条技术，建立一种检测呋喃唑酮代谢物的方法；
2.建立该方法的检测体系并进行初步优化；
3.测试该方法的灵敏度、特异性、准确性。
三、研究方法
1.免疫试纸条制备
以呋喃唑酮代谢物为免疫原，制备兔抗呋喃唑酮代谢物多克隆抗体，将其钝化后，经过纯化和检测后，制备出呋喃唑酮代谢物抗原检测卡片。具体方法为：将呋喃唑酮代谢物抗原用PBS稀释至一定浓度，与戊二醛共混后丙酮提纯。制备免疫卡片的基质为一定尺寸的贴花纸，分别在贴花纸中央和底部分别加印10μg/mL的抗体和10μg/mL的二抗。并于上述2个位置之间，增加10mg/mL的蔗糖-10mg/mL的未标记的呋喃唑酮代谢物对。
2.样品制备
样品为口服呋喃唑酮代谢物的人群尿液和血液等生物样品，直接离心沉淀，超声分散后，用PBS溶液进行稀释得到一定浓度的样品液。
3.免疫层析实验
将处理好的样品滴入已经制备好的呋喃唑酮代谢物抗原卡片上的标记位点位置处，待样品经过滤纸时，交叉与二抗结合的胶体金颗粒与单克隆抗体结合形成浅色带状线。同时，标准品以及呋喃唑酮代谢物为阴性对照也进行检测。根据检测结果，定量分析样品中的呋喃唑酮代谢物的浓度。
四、预期结果
通过胶体金免疫层析试纸条技术，建立一种准确、高效、简便的检测呋喃唑酮代谢物的方法，并进行初步应用。同时，通过实验对该方法的检测灵敏度、特异性、准确性进行测试与分析。为呋喃唑酮代谢物的检测提供一种快速、准确的检测方法，为保障人体健康、食品安全提供实用检测技术支持。