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转录因子Sp1和Sp3对肝癌中MALAT1转录调控的分子机制研究的开题报告
开题报告
题目：转录因子Sp1和Sp3对肝癌中MALAT1转录调控的分子机制研究
一、研究背景
肝癌是一种高度致死性的癌症，目前治疗难度较大。近年来，研究表明非编码RNA（ncRNA）在肝癌发生和发展中发挥了重要作用。MALAT1是一种长链ncRNA，早期研究表明它在多种肿瘤中的过度表达，包括肝癌。但是，MALAT1的转录调控机制并不清楚。
转录因子Sp1和Sp3已被证明在多种癌症中参与了基因的转录调控。同时，Sp1和Sp3在肝癌中的表达也受到了注目。然而，Sp1和Sp3对于MALAT1转录调控在肝癌中的机制并没有被广泛研究。
因此，本研究旨在探讨转录因子Sp1和Sp3是否参与肝癌中MALAT1的转录调控，及其具体的调控机制。
二、研究内容及方法
本研究将利用肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721来研究Sp1和Sp3对MALAT1的转录调控。具体内容和方法如下：
1.检测Sp1和Sp3在肝癌组织和正常组织中的表达
使用RT-PCR和Westernblot检测Sp1和Sp3在肝癌组织和正常组织中的表达水平。如果有差异，则说明Sp1和Sp3在肝癌中发挥了作用。
2.分析Sp1和Sp3对MALAT1转录的调控作用
使用HepG2和SMMC-7721细胞株，利用RNA干扰技术或是过表达技术，分别降低或提高Sp1和Sp3的表达水平，然后使用RT-PCR检测MALAT1的表达水平。
3.研究Sp1和Sp3对MALAT1转录调控的分子机制
对于Sp1和Sp3影响MALAT1转录调控的分子机制，我们将使用ChIP-PCR实验来分析Sp1和Sp3是否直接结合在MALAT1的启动子上。同时，还将观察甲基化和翻译后修饰等表观遗传学改变对于MALAT1转录的影响。
三、预期结果
我们预计本研究可以得到以下结果：
1.Sp1和Sp3在肝癌中的表达水平明显高于正常组织。
2.RNA干扰或过表达Sp1和Sp3会显着影响MALAT1的表达水平。
3.Sp1和Sp3直接结合于MALAT1的启动子区域，通过影响甲基化和翻译后修饰等机制参与了MALAT1的转录调控。
四、研究意义
本研究将为肝癌中ncRNA的转录调控机制提供新的线索，同时为肝癌的治疗提供新的靶点。通过理解MALAT1的转录调控机制，有可能为设计更有效的肝癌治疗方法提供帮助。此外，本研究对于Sp1和Sp3在肝癌中发挥的作用也具有一定的探究意义。
五、研究进度安排
本研究计划于2022年9月开始，预计为期两年。具体工作进度安排如下：
第一年：
1.研究Sp1和Sp3在肝癌和正常组织中的表达。
2.使用RNA干扰或过表达技术研究Sp1和Sp3对MALAT1转录的调控。
第二年：
1.通过ChIP-PCR实验研究Sp1和Sp3是否直接结合在MALAT1的启动子上。
2.观察Sp1和Sp3影响MALAT1转录调控的表观遗传学机制。
3.对实验结果进行统计学分析和验证。
六、参考文献
1.TripathiV,EllisJD,ShenZ,etal.Thenuclear-retainednoncodingRNAMALAT1regulatesalternativesplicingbymodulatingSRsplicingfactorphosphorylation.MolCell.2010;39(6):925–938.
2.YangMH,HuZY,XuC,etal.MALAT1PromotesColorectalCancerCellProliferation/MetastasisviaHMGB2-mediatedPI3K/AKTSignalingPathway.CancerResTreat.2020;52(3):707-720.
3.ShinS,RossowKL,GrandeJP,etal.InhibitionofrenalcancercellgrowthbytargetingtranscriptionfactorSp1.JExpClinCancerRes.2009;28(1):64.