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转录因子Sp1和Sp3对肝癌中MALAT1转录调控的分子机制研究的任务书 任务书 题目:转录因子Sp1和Sp3对肝癌中MALAT1转录调控的分子机制研究 背景: 肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率逐年增加。MALAT1是一种长链非编码RNA,在肝癌中高表达,并参与多种生物学过程。转录因子Sp1和Sp3已知是MALAT1转录的重要调控因子,但其具体调控机制尚不清楚。因此,对Sp1和Sp3在肝癌中MALAT1转录调控的分子机制进行研究,对深入了解肝癌的发生与发展具有重要意义。 研究目的: 1.探究Sp1和Sp3在肝癌中MALAT1转录调控中的作用机制。 2.研究Sp1和Sp3对MALAT1表达的影响及其在肝癌中的生物学意义。 3.深入了解Sp1和Sp3的生物学特性及其在肝癌发生和发展中的作用。 研究方法: 1.建立肝癌细胞株,并构建MALAT1启动子控制下表达的荧光素酶报告基因的稳定转染细胞系。 2.采用ChIP-PCR、LuciferaseReporterAssay等方法研究Sp1和Sp3在MALAT1启动子区域中的结合情况和调控作用。 3.利用Westernblot和qRT-PCR等方法,检测Sp1和Sp3对MALAT1表达的影响及其在肝癌细胞中的作用。 4.通过生物信息学分析及生化实验,深入了解Sp1和Sp3的生物学特性及其在肝癌发生和发展中的作用。 预期成果: 1.明确Sp1和Sp3在肝癌中MALAT1转录调控的分子机制。 2.证实Sp1和Sp3对MALAT1表达的影响及其在肝癌中的生物学意义。 3.深入了解Sp1和Sp3的生物学特性及其在肝癌发生和发展中的作用。 4.为深入了解肝癌的发生与发展提供新的思路和实验数据。 时间计划: 第一年:建立肝癌细胞株并构建MALAT1启动子控制下表达的荧光素酶报告基因的稳定转染细胞系,并初步分析Sp1和Sp3对MALAT1的调控作用。 第二年:通过Westernblot和qRT-PCR等方法,进一步检测Sp1和Sp3对MALAT1表达的影响及其在肝癌细胞中的作用,并利用生物信息学手段对其生物学特性进行深入分析。 第三年:通过ChIP-PCR、LuciferaseReporterAssay等方法,研究Sp1和Sp3在MALAT1启动子区域中的结合情况和调控作用,并撰写相关论文。 经费预算: 本研究计划预计需要资金50万元,包括研究经费、设备购置费、实验材料费和出版费等各项费用。 研究经费:30万元。 设备购置费:10万元。 实验材料费:8万元。 出版费:2万元。 参考文献: 1.GuanY,etal.(2017).MALAT1promotescellproliferation,migration,andinvasioninbladdercancerwithEMTinduction.LabInvest,97(7):844-855. 2.MaoZ,etal.(2017).Roleoflongnon-codingRNAMALAT1inhepatocellularcarcinomaprogression.BiomedPharmacother,91:386-393. 3.ZhengJ,etal.(2017).Longnon-codingRNAMALAT1regulatesBLCAPmRNAexpressionthroughbindingtomiR-619-5pinhepatocellularcarcinoma.ExpCellRes,357(2):324-335.