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临床微生物检验标本的采集在临床微生物检验工作中,标本的正确选择、采集和运送是保证实验室质量的重要环节,是实验室工作准确和有效的前提。 第一节标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则二、标本的处理其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检,标本应置于一定环境中保存,如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中,脑脊液等则要在25℃保存。 患者标本中可能含有大量致病菌,不管标本运送距离远近,都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁,容器必须包装好,防止送检过程中倒翻或碰破流出。临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、尿液、伤口的脓液、胸水、腹水、粪便、痰液及泌尿生殖系统的分泌物等,下面分别介绍各种标本的采集方法及检测出不同病原体的临床意义。 第二节血液一、标本采集2.采血部位 通常采血部位为肘静脉。 疑似细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜。 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者,在病灶或者髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。3.静脉穿刺和培养瓶接种程序 在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手 套固定静脉,不可接触穿刺点。 (2)用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养 瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。 (3)血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。 立即送检,切勿冷藏。 4.采血量 自动化仪器要求成人采血量是8~10ml/瓶,儿童1~5ml/瓶。5.血培养次数和采血时间 只要怀疑血液细菌感染,应即刻采集。 采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行,在1h内采集2~3次做血培养。 对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液,或于寒战或发烧后1h进行。 入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3d,每天采2份。 6.标本运送 采血后应该立即送检,如不能立即送检,可室温保存,切勿冷藏。 二、血液中常见的病原体三、临床意义第三节脑脊液一、标本采集二、脑脊液中常见病原体三、临床意义真菌性脑膜炎:最常见于隐球菌脑膜炎,其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎日渐增多,特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发,如AIDS、恶性肿瘤,严重糖尿病、SLE等患者易发生。流行性乙型脑炎:是一种人兽共患的自然疫源性疾病。传染源为患者和家禽、家畜及野生动物,蚊虫为传播媒介,经蚊虫叮咬、吸血而传播,人群对本病普遍易感,感染后多数人无症状而成为隐性感染。但可获得持久免疫力,再次发病者极少见。少数患者病情严重,病死率高,可留有后遗症。第四节脓液一、标本采集二、脓液中常见病原体三、临床意义第五节痰液一、标本采集支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。 小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳痰时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。 注意:对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。 二、痰标本中常见病原体三、临床意义第六节粪便一、标本采集粪便标本送检 对住院的腹泻成人患者,应采集住院3日内粪便标本送检,标本采集后应尽快送检,有条件的提倡使用运送培养基。二、粪便中常见的病原体三、临床意义细菌性食物中毒 常可危及生命,常见于沙门菌、副溶血弧菌、致病性大肠埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭菌、腊样芽胞杆菌食物中毒。多发生在夏秋季,以暴发和集体发病为特征,是一种严重的病症。 第七节尿液一、标本采集采集容器的要求:洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏、广口、容积应>50ml、盒盖易于开启,不含防腐剂和抑菌剂。 标本采集后应及时送检、及时接种,室温下保存时间不得超过2小时(夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存),4℃冷藏保存时间不得超过8小时。但应注意淋病奈瑟菌培养时标本不能冷藏保存。 二、常见病原体三、临床意义尿路感染主要经尿道口上行感染所致,极少数为血行感染。 尿路感染常见肾盂肾炎(急性和慢性)、膀胱炎(急性为主)、尿道炎(细菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎)、前列腺炎(慢性常见)等。 尿路感染需要明确部位和急性与慢性,主要依病原菌检测,还要紧密结合临床综合考虑做出诊断。第八节生殖道标本一、标本采集二、常见的病原体8种STD分别是:艾滋病、淋病、梅毒、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、尖锐湿疣、生殖器疱疹。 其病原体分别为:人类免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋体、杜克雷嗜血杆菌、沙眼衣原体L1、L2、L3血清型、支原体和衣原体、人类乳头状病毒、人类单纯疱疹病毒2。第九节厌氧培养标本的采集一、标本采集与运送标本的采集