基于iTRAQ技术的传染性法氏囊病病毒感染DF-1细胞的亚细胞蛋白组分析的任务书.docx

基于iTRAQ技术的传染性法氏囊病病毒感染DF-1细胞的亚细胞蛋白组分析的任务书
一、研究背景
传染性法氏囊病（Infectiousbursaldisease，IBD）是一种由IBD病毒感染引起的急性或亚急性传染病，主要影响家禽类动物，如鸡、鸭等。这种病毒具有高度传染性和强烈病原性，在某些情况下，可导致家禽严重死亡，造成经济上的损失。因此，深入研究IBD病毒的感染机理和致病原理对预防和控制传染性法氏囊病具有重要意义。
传染性法氏囊病病毒（Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV）是一种双股RNA病毒，具有32kb的基因组大小。IBDV主要感染法氏囊和B淋巴细胞，干扰它们的功能，从而引发严重的免疫抑制反应。目前，研究表明，IBDV感染DF-1细胞（一类鸡乳头瘤细胞系）可以模拟IBDV感染鸡体内B淋巴细胞的过程。
一般来说，生物体的功能和生理学过程主要由蛋白质决定，因此，针对细胞感染后的亚细胞蛋白变化进行分析对深入了解IBDV感染DF-1细胞的分子机制非常重要。iTRAQ技术是一种高通量的蛋白质组学技术，可以同时检测多个样品的蛋白质组分变化。因此，本研究将采用iTRAQ技术对IBDV感染DF-1细胞后亚细胞蛋白组分析，以期挖掘出IBDV感染DF-1细胞的潜在分子机制。
二、研究目的
通过iTRAQ技术对IBDV感染DF-1细胞后亚细胞蛋白变化进行分析，以期：
1.发现IBDV感染DF-1细胞后的蛋白质组分变化规律，探究其感染机理和致病原理。
2.分析IBDV感染DF-1细胞对细胞代谢、信号传导和免疫功能的影响，以期发现感染的潜在靶点。
3.为深入研究IBDV感染机制提供实验基础，为疫苗研究和病理诊断提供重要参考。
三、研究内容
1.细胞培养和病毒感染
采用DF-1细胞作为研究对象，培养至70%-80%的密度后，用IBDV进行感染，设立感染组和对照组。
2.蛋白质提取和定量
采用三遍亲和层析法提取亚细胞蛋白，用BCA法对提取的蛋白质进行定量。
3.iTRAQ标记和质谱分析
将感染组和对照组的蛋白质进行iTRAQ标记，并分别用高分辨质谱仪进行质谱分析。采用搜寻数据库的方法鉴定并定量蛋白质差异。
4.生物信息学和功能分析
对质谱分析获得的数据进行生物信息学分析，包括蛋白质亚细胞定位、生物通路、功能和相互作用网络分析等。
四、研究意义
1.深入了解IBDV感染DF-1细胞的分子机制，有助于提高预防和控制传染性法氏囊病的效果。
2.发现感染的潜在靶点，为深入研究感染机制提供实验基础，为疫苗研究和病理诊断提供重要参考。
3.探究DF-1细胞代谢、信号传导和免疫功能的变化规律，对了解细胞的正常生理功能与病理过程有一定帮助。
4.探索新型病毒性疾病发生机理及方法，拓展生物科学领域的研究范围。
五、研究进度
1.前期准备：细胞培养，IBDV病毒培养，蛋白质提取方法的优化等。
2.样品准备：根据实验方案选取感染组和对照组，进行蛋白质提取和定量。
3.iTRAQ标记：将提取的蛋白质进行iTRAQ标记。
4.质谱分析：采用高分辨质谱仪进行质谱分析。
5.数据处理：鉴定和定量蛋白质差异，进行生物信息学和功能分析。
6.结题报告：总结研究结果，撰写结题报告。
六、预期成果
1.发表高水平论文1篇，申报专利1项。
2.在IBDV感染DF-1细胞的分子机制和致病原理方面取得新的进展。
3.挖掘出感染DF-1细胞的潜在靶点，为深入研究感染机制提供实验基础，为疫苗研究和病理诊断提供重要参考。
4.获得学术研究经验，提高科研实践能力。