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蛇床子素对实验性脑缺血的神经保护作用及其机制的初步探讨的开题报告
研究背景
脑缺血是指由于大脑供血不足或中断引起的神经细胞受损或死亡，是导致中风的主要原因之一。脑缺血目前缺乏有效的治疗方法，因此寻找新的治疗手段具有重要的临床意义。
蛇床子素（TANS）是从葛根属植物龙牙葛中提取的一种黄酮类化合物，已经证实具有很强的抗氧化、抗炎和抗凋亡作用，对多种神经系统疾病具有保护作用。然而，蛇床子素对于实验性脑缺血的神经保护作用及其作用机制仍需进一步研究。
研究目的
本研究旨在探究蛇床子素在实验性脑缺血中的神经保护作用及其作用机制。
研究内容
1.建立实验性脑缺血模型：采用大鼠双侧颈总动脉结扎法（BCCAO）模型建立实验性脑缺血模型。
2.药物处理：将大鼠随机分为正常对照组、模型组和蛇床子素处理组，蛇床子素处理组给予TANS10mg/kg体重静脉注射。
3.观察神经行为学：运用Morris水迷宫检测认知功能和旋转试验检测神经功能。
4.检测神经元凋亡和炎症因子：采用免疫荧光及Westernblot检测海马区神经元凋亡和TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子的表达水平。
研究意义
本研究将从实验角度探讨蛇床子素对实验性脑缺血的神经保护作用及其机制，为临床治疗脑缺血提供新的药物选择。此外，对于认识蛇床子素的药理学作用及其神经保护机制也具有一定的科学意义。
研究预期
通过本次研究，我们预计能够得到以下结论：
1.蛇床子素可以减轻实验性脑缺血大鼠的神经行为学损伤；
2.蛇床子素可以抑制实验性脑缺血大鼠海马区神经元凋亡；
3.蛇床子素可以降低实验性脑缺血大鼠海马区炎症反应。
研究方法
1.实验动物：Wistar大鼠，雄性，体质量250g±30g，由南京大学动物实验中心提供。
2.药物制备：将蛇床子素粉末溶于注射用水中制备成10mg/ml的药液。
3.实验操作：
（1）手术操作
大鼠取坐位，面向左，颈部放在麻醉桶内，用去皮的小锯骨锯开右侧颈侧面，找到颈总动脉及其分支后颈动脉。结扎后颈动脉及其上颈总动脉。再在颈总动脉下端地方缝合止血。结扎过程中注意颈总动脉小动脉要避免损伤。
（2）神经行为学检测
Morris水迷宫检测大鼠空间记忆功能，旋转试验检测大鼠神经系统损伤情况。
（3）组织取样
取大鼠海马组织，制备蛋白质，Westernblot检测神经元凋亡和炎症因子表达水平，免疫荧光染色检测神经元凋亡。
4.数据处理：使用SPSS软件进行数据处理和统计分析，数据以均值±标准差表示，差异性采用ANOVA分析，P<0.05为显著性差异。
研究计划
本次研究计划为期6个月，具体进度如下：
第1-2个月：熟悉实验动物的饲养、建立大鼠BCCAO模型；
第3-4个月：分组、药物处理以及相关的生物学检测；
第5-6个月：数据处理和分析，撰写论文。
参考文献
1.ZhangZ,SunB,GaoX,etal.TanshinoneIIAAttenuatesNeuroinflammationinExperimentalIschemicStrokeinthePC12CellLinebySuppressingNF-κBActivation[J].CellMolNeurobiol,2020,40(4):629-640.
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3.DingY,ChenM,WangM,etal.TanshinoneIIAprotectsbrainmicrovascularendothelialcellsagainstoxygen-glucosedeprivation/reperfusion-inducedbarrierdysfunctionthroughactivatingtheRHOA/ROCK1/MLCpathway[J].EurJPharmacol,2020,874:172999.