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第五章微生物的生长繁殖与生存因子第一节微生物的生长繁殖一、测生长量 一、细菌的个体生长和同步生长 1、同步培养(synchronousculture):即设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂同期中,然后分析此群体的各种生物化学特征,从而了解单个细胞所发生的变化。 2、同步生长(synchronousgrowth):通过同步培养而使细胞群体处于分裂步调的状态,就称同步生长。三、典型生长曲线根据细菌生长繁殖速率将生长曲线分四个阶段:缓慢期(延迟期、滞留适应期)1特点: 细胞数目不增加(R=0) 细胞长、大 代谢旺盛(RNA含量增加) 诱导酶迅速合成 对不良条件敏感,抵抗力降低 2影响因素 菌种 接种龄:即“种子”的群体生长年龄,即处在生长曲线上的哪一个阶段,这是一种生理年龄。 接种量:接种量的大小明显影响延滞期的长短。 种子培养基成分:接种到营养丰富的天然培养基中的微生物,要比接种到营养单调的组分培养基中的延滞期短。对数期(指数生长期)1特点: 生长速率常数最大,繁殖数>死亡数 代时短,即细胞每分裂一次所需的代时G(增代时间,generationtime)或原生质增加一倍所需的倍增时间(doublingtime)最短. 成分均匀 酶活力高,酶系活跃,代谢旺盛。 2三个重要参数对数期(指数生长期)稳定期(最高生长量期)1特点: 细胞数目不增加(R=0),即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,或正生长与负生长相等的动态平衡之中。 菌体产量达到了最高点,而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出一定的比例关系 细胞长、大 代谢旺盛(RNA含量增加) 诱导酶迅速合成 对不良条件敏感,抵抗力降低 2稳定期到来的原因主要是: 营养物尤其是生长限制因子的耗尽; 营养物的比例失调,如C/N比值不合适; 酸、醇、毒素或H20等有害代谢产物的累积; pH、氧化还原势等物化条件越来越不适宜。衰亡期什么时期菌体代谢产物最多五、连续培养连续培养(continuousculture)又称开放培养(openculture),是相对于上述绘制典型生长曲线时所采用的那种单批培养(batchculture)或密闭培养(closedculture)而言的。 原理:通过认识稳定期到来,并采取相应的有效措施:反“稳定期”的到来。.保持细菌培养液浊度恒法器(turbidostat)这是根据培养器内微生物的生长密度,并借光电控制系统来控制培养液流速,以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。在恒浊器中的微生物,始终能以最高生长速率进行生长,并可在允许范围内控制不同的菌体密度。 恒化器(chemostat或bactosen)与恒浊器相反,恒化器是一种设法使培养液流速保持不变,并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置。.分批培养与连续培养特征的比较同步培养同步培养生长曲线特点第二节微生物的生存因子一、温度2、高温灭菌3、低温保藏二、氧化还原电位(Eh)三、水分四、辐射2、紫外线: 杀菌波长范围:240—300nm 杀菌力最强范围:255—265nm3、电离辐射五、溶解氧六、pH值七、氧气八、化学药物杀菌机理: 使蛋白质巯基氧化(成二硫基) 2R—SH+2XR—S—S—R+2XH具有降低表面张力效应的物质。