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细菌基因组DNA的提取ppt课件.ppt

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实验：细菌基因组DNA的提取目录一、实验目的二、实验原理三、仪器、试剂（5）1%SDS（十二烷基硫酸钠）：1gSDS溶于100ml 蒸馏水，灭菌后-4℃保存 （6）mol/LNaCl：称取292.5gNaCl，溶于1000ml蒸馏水，灭 菌后-4℃保存。 （7）无水乙醇及70%乙醇 （8）超纯水 （9）TE缓冲液：10mmol/LTris-HCl， 1mmol/LEDTA-Na2（pH：8.0） （10）饱和酚 （11）氯仿：异戊醇（25：1） 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤五、实验注意事项 1、简要叙述酚氯仿抽提ＤＮＡ体系后出现的现象及其成因。 酚氯仿抽提DNA后，会使溶液分层，上层为水相，含有 DNA；中间为蛋白（有时看不到）；下层为有机相。原因是酚 氯仿可以使蛋白质变性，从而从溶液中析出，但是蛋白密度 会小于酚氯仿，所以离心后它分布在中间；而DNA溶于水而不 溶于有机相。 2、沉淀ＤＮＡ时为什么要用无水乙醇？ 是因为DNA不溶于乙醇，而乙醇可以夺取水，从而使得DNA 聚集沉淀，如果用乙醇沉淀的话一定要用2倍以上的无水乙醇。 也可以用异丙醇沉淀。