一种肺炎球菌缀合疫苗及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107412764A(43)申请公布日2017.12.01(21)申请号201710277407.2(51)Int.Cl.(22)申请日2014.09.23A61K39/385(2006.01)A61K39/116(2006.01)(66)本国优先权数据A61K39/09(2006.01)201410359212.92014.07.25CNA61P31/04(2006.01)(62)分案原申请数据A61K47/69(2017.01)201410487165.62014.09.23A61K47/64(2017.01)(71)申请人武汉博沃生物科技有限公司地址430075湖北省武汉市东湖高新区高新大道858号生物医药产业园中小企业园A9-2栋(72)发明人吴克刘昊智程超王文灏(74)专利代理机构上海精晟知识产权代理有限公司31253代理人熊娴冯子玲权利要求书1页说明书19页附图2页(54)发明名称一种肺炎球菌缀合疫苗及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种肺炎球菌缀合疫苗，该结合疫苗为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的结合疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球。该肺炎球菌缀合疫苗的制备方法将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白分别与纳米微球经偶联而成。本发明提供的肺炎球菌缀合疫苗制备工艺简单，采用纳米微球为连接物的肺炎球菌缀合疫苗能够增强小鼠Th1型免疫应答，以及多糖特异性抗体的免疫持效性、特异性和亲和性，此外还可诱导小鼠产生轮状病毒抗体；具备两种疫苗的预防效果；因此具有十分广阔的应用前景。CN107412764ACN107412764A权利要求书1/1页1.一种肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：所述肺炎球菌缀合疫苗为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的肺炎球菌缀合疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球。2.根据权利要求1所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：所述磁性纳米微球的磁性微粒位于磁性纳米微球的内部为核，高分子材料包裹于磁性微粒的外部。3.根据权利要求2所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：高分子材料为生物高分子材料，选自壳聚糖、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)中的一种或以上的混合物。4.根据权利要求1所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：多价肺炎球菌多糖为多种肺炎球菌荚膜多糖，优选为分离提纯血清型肺炎球菌荚膜上的荚膜多糖，所述血清型肺炎球菌的血清型包括1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和/或33F。5.根据权利要求1所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：多价肺炎球菌多糖与两种载体蛋白的质量比为(0.5～2)：1。6.根据权利要求1所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：所述载体蛋白选自重组人轮状病毒蛋白、白喉类毒素，破伤风类毒素，载体蛋白CRM197，嗜血流感杆菌表面蛋白HiD，百日咳Prn表面蛋白，百日咳Fha抗原和/或肺炎球菌表面蛋白A(rPspA)。7.根据权利要求1所述的肺炎球菌缀合疫苗，其特征在于：所述载体蛋白中有一种为嗜血流感杆菌表面蛋白HiD或肺炎球菌表面蛋白A(rPspA)。8.权利要求1～7任一所述肺炎球菌缀合疫苗的制备方法，其特征在于：将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白分别与磁性纳米微球经偶联而成。9.根据权利要求8所述的肺炎球菌缀合疫苗的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：a)分别分离提纯多种血清型肺炎球菌荚膜上的荚膜多糖；b)分别制备并分离提纯所选用的多种载体蛋白；c)分别将各种荚膜多糖与磁性纳米微球偶联成多糖-磁性纳米微球偶联体；d)再将多糖-磁性纳米微球偶联体分别与多种载体蛋白偶联结合；e)分离纯化步骤d)所得偶联体成所述肺炎球菌缀合疫苗原液。10.根据权利要求8所述的肺炎球菌缀合疫苗的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：a)分别分离提纯多种血清型肺炎球菌荚膜上的荚膜多糖；b)分别分离提纯所选用的多种载体蛋白；c)分别将各种荚膜多糖与磁性纳米微球偶联成多糖-磁性纳米微球偶联体，再经化学改性，从而将所述多糖-磁性纳米微球偶联体表面未与多糖反应的-OH改性为-CHO；d)再将多糖-磁性纳米微球偶联体分别与多种载体蛋白偶联结合；e)分离纯化步骤d)所得偶联体成所述肺炎球菌缀合疫苗原液。2CN107412764A说明书1/19页一种肺炎球菌缀合疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种疫苗，具体说，是涉及一种肺炎球菌缀合疫苗疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。背景技术[0002]一、微生物对人体的危害及应对措施[0003]微生物通常