一种粉防己生物碱的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107496508A(43)申请公布日2017.12.22(21)申请号201710713252.2(22)申请日2017.08.18(71)申请人合肥丰洁生物科技有限公司地址230000安徽省合肥市经济技术开发区宝塔路以西、齐云路以北综合厂房605室(72)发明人王亚(51)Int.Cl.A61K36/59(2006.01)C07G5/00(2006.01)A61P9/12(2006.01)A61P9/10(2006.01)A61P9/06(2006.01)A61P29/00(2006.01)A61P37/06(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种粉防己生物碱的制备方法(57)摘要本发明公开了一种粉防己生物碱的制备方法，通过酸液渗漉的方式对原材进行处理，能够预先去除较多的非需碱物质，如轮环藤酚碱等，简化了后续分离的工序，而通过低压柱层析分离的方法可高效、快速地将粉防已甲素和乙素完全分离分离，互不掺杂，纯度很高，品质好。CN107496508ACN107496508A权利要求书1/1页1.一种粉防己生物碱的制备方法，其特征在于：通过以下步骤实现：S1，取用100重量份的粉防己药材，通过研磨机研磨，得到粗粉；S2，向粗粉中加入0.5%H2SO4溶液，充分搅拌，得到酸水渗漉液；S3，向酸水渗漉液中缓慢加入新鲜石灰乳，调节pH值至9-10，静置15分钟后抽滤，去除碱水液得到泥黄色沉淀；S4，向泥黄色沉淀中加入净沙，并搅拌至充分混合，放置到80℃烘干箱内烘干，随后分批引入索氏提取器中用乙醚多次提取至生物碱提尽，回收乙醚，得到乙醚提取物；S5，用95%、40-60ml乙醇溶液回流热溶，倾倒入500ml水中，加入30重量份的NaCl溶液进行盐析，随后加热至凝结，静置直到完全沉淀，进行抽滤，得到含有粉防己甲素和粉防己乙素的白色沉淀；S6，低压柱层析分离，具体方法为：S61，采用减压干法装法装柱，所装硅胶至少30重量份；S62，加少量丙酮热溶，用滴管加到1.5g硅胶上，仔细拌匀，水浴上蒸干，碾细，后加入白色沉淀，并保持其表面平整；S63，洗脱，滴管顺层析柱柱壁仔细加入少量洗脱剂，当液面达到一定高度时，再一次加入其余洗脱剂，共约250ml，调动所需压力，0.6-1.2kg/cm2，约40分钟后流出，控制流速1ml/分，每10分钟左右一管，收12-15份，洗脱全过程约3小时；S64，各流份分别移入小玻璃蒸发器中，于水浴上浓缩，以汉防已甲素、乙素为标准品对照，合并相同组分，分别获得甲、乙素粗品，用丙酮重结晶，得到生物碱纯品。2.根据权利要求1所述的一种粉防己生物碱的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所加0.5%H2SO4溶液的量以能将生药粉末润湿为准，并充分拌匀，放置半小时。3.根据权利要求1所述的一种粉防己生物碱的制备方法，其特征在于：步骤S4中，净沙必须事前洗净烘干，拌和量优选低于120重量份。4.根据权利要求1所述的一种粉防己生物碱的制备方法，其特征在于：步骤S4中，检查生物碱是否提尽的方法为：取最后一次乙醚提取液约数滴，挥去乙醚，残渣加5%HCl0.5ml溶解后，加改良碘化铋钾试剂一滴，无沉淀折出或明显浑浊时，表明生物碱已提尽，反之，应继续提取。5.根据权利要求1所述的一种粉防己生物碱的制备方法，其特征在于：所述洗脱剂优选为环已烷-惭酸乙酯-二乙胺按6：2：0.8的比例混合溶液。2CN107496508A说明书1/3页一种粉防己生物碱的制备方法技术领域[0002]本发明涉及生物技术领域，具体是一种粉防己生物碱的制备方法。[0003]背景技术[0004]粉防己为防己科千金藤属植物粉防己的块根，是我国常用中草药之一，具祛风除湿、利尿消肿、行气止痛的作用。粉防己的主要活性成分是生物碱，例如粉防己碱、防己诺林碱等。粉防己生物碱，具有抗高血压、抗心肌缺血及再灌注损伤、抗心律失常、抗炎及免疫抑制、抗肿瘤广泛的生理活性作用。[0005]虽然近年来在粉防己生物碱提取方面出现研究报告和专利文件，但大多基于色谱柱的方法分离、提纯，其间使用到大量的辅助制剂，如高浓度乙醇等，工序较为复杂，提纯工序存在诸多干扰因素，制约了粉防己生物碱的制备纯度。[0006]发明内容[0007]本发明的目的在于提供一种粉防己生物碱的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。[0008]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种粉防己生物碱的制备方法，通过以下步骤实现：S1，取用100重量份的粉防己药材，通过研磨机研磨，得到粗粉；S2，向粗粉中加入0.5%H2SO4溶液，充分搅拌，得到酸水渗漉液；S3，向酸水渗漉液中缓慢加入新鲜石灰乳，调节pH值至