人鼠嵌合型基因工程抗体Hm2E8的研究的任务书.docx

人鼠嵌合型基因工程抗体Hm2E8的研究的任务书
任务背景：
Hm2E8是一种抗人肿瘤的嵌合型抗体，可对肿瘤细胞表面上的HER2进行特异性识别和结合，从而发挥抗肿瘤作用。目前，已经有多个研究小组对Hm2E8进行了研究和开发，但由于其源自于小鼠，因此在临床应用上存在一定的局限性。为了克服这一问题，需要利用基因工程技术对Hm2E8进行人鼠嵌合修饰，以提高其在人体内的稳定性和活性，从而更好地实现其抗肿瘤作用。
任务要求：
1.确定Hm2E8的重链和轻链序列，利用计算机辅助设计方法进行序列比对和分析，找出其与人源抗体的同源结构域。
2.选取适当的人源抗体框架，将Hm2E8的重链和轻链序列嵌合进去，设计出人鼠嵌合型基因工程抗体。
3.构建人鼠嵌合抗体表达载体，并在适当细胞系中进行转染和表达，利用Westernblot等方法进行抗体的鉴定和纯化。
4.进行抗体的体外功能评价，如ELISA、流式细胞术等，评估其对HER2的特异性识别和结合能力，并与未修饰的Hm2E8进行比较。
5.对抗体的体内药效学进行评价，建立小鼠的肿瘤模型，测试嵌合型抗体的治疗效果，并与未修饰的Hm2E8进行比较。
6.对Hm2E8人鼠嵌合修饰的优化方案进行探究，如基因座点的选择、替换率的优化、修饰后的抗原再识别能力等问题的研究。
任务成果：
1.确定Hm2E8的重链和轻链序列，得到Hm2E8人鼠嵌合型抗体的设计方案。
2.构建人鼠嵌合抗体表达载体，获得嵌合型抗体的表达和纯化。
3.通过体外和体内药效学评价，评估嵌合型抗体的活性和特异性，并与未修饰的Hm2E8进行比较。
4.优化Hm2E8的人鼠嵌合修饰方案，并探索其在抗肿瘤治疗中的应用前景。