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嗜酸乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的表达研究的中期报告
嗜酸乳杆菌是一种常见的益生菌，被广泛应用于乳制品和保健品的生产中。共轭亚油酸（CLA）是一种对人体健康有益的脂肪酸，具有抗癌、调节血脂和增强免疫力等多种生物功能。嗜酸乳杆菌可以通过CLA异构酶催化乳酸转化为CLA，从而生产富含CLA的乳制品。因此，CLA异构酶在嗜酸乳杆菌中的表达研究具有重要意义。
本研究以嗜酸乳杆菌为研究对象，采用PCR技术克隆获得CLA异构酶基因，构建重组质粒pET28a-CLA，并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过SDS-PAGE和Westernblotting分析，确定了重组CLA异构酶的分子量和表达情况。
进一步研究表明，嗜酸乳杆菌CLA异构酶基因的表达受到多种因素的影响，包括温度、pH值、营养成分等。在逐步优化表达条件的过程中，我们发现将菌体培养温度由37℃调整至30℃，可以明显提高重组CLA异构酶的表达量。同时，添加0.5%牛肉膏和0.1mMIPTG也能促进其表达。
总体而言，本研究初步探索了嗜酸乳杆菌CLA异构酶基因的表达研究，并发现了其表达的优化条件，为后续研究CLA生产提供了基础数据支持。