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双荧光T-RFLP方法的建立及应用的中期报告 双荧光T-RFLP方法是一种基于限制性片段长度多态性(T-RFLP)的分子生态学技术。该技术利用双标记引物在PCR扩增的过程中引入荧光标记,然后通过限制性内切酶切割PCR产物,生成多个不同的DNA片段,这些片段经过电泳分离,再经过荧光检测和比对,可以获得样本中不同细菌种群的相对丰度信息。 在本次中期报告中,我们已经建立了双荧光T-RFLP方法,并应用于水体中细菌群落的分析。具体而言,我们采集了不同来源、不同污染程度的水体样本,通过DNA提取、PCR扩增及荧光标记等步骤,获得了T-RFLP指纹图谱。 通过对不同样本的T-RFLP指纹图谱进行比对和聚类分析,我们发现不同来源水体样本的细菌群落结构存在明显的差异,同一来源水体的不同污染程度也会对细菌群落结构产生不同程度的影响。同时,我们还检测到了一些特定的T-RFLP峰,这些峰的存在可能与某些细菌群落的优势种相关联。 综上所述,我们的研究为水体细菌群落的研究提供了一种高效、灵敏、准确的分子生态学方法,并且为进一步深入研究水体污染与细菌群落变化的关系提供了有力的工具。