发菜海藻糖合成酶及水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达的任务书.docx

发菜海藻糖合成酶及水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达的任务书
任务：
1.克隆发菜海藻糖合成酶基因和水解酶基因。
2.将两个基因分别插入大肠杆菌中，并构建相关表达系统，实现基因在大肠杆菌中的表达。
3.对表达系统进行改良，提高海藻糖合成酶和水解酶的表达水平。
4.利用表达的海藻糖合成酶和水解酶进行海藻糖的生产和水解反应。
5.对表达和产物进行分析、优化和纯化。
步骤：
1.通过文献检索和设计合成基因序列，设计合成酶基因和水解酶基因的引物。
2.从发菜中提取基因组DNA或cDNA，PCR扩增出目标基因的DNA序列。
3.将PCR产物进行凝胶电泳，提纯目标DNA。
4.将目标DNA与载体进行连接，构建重组质粒。
5.将重组质粒导入大肠杆菌中，利用宿主细胞的生理环境和表达系统实现基因在大肠杆菌中的表达。
6.对表达情况进行检测和分析，如蛋白质表达水平、酶活力等。
7.针对表达情况进行优化，如改变培养条件、选用适当的宿主细胞等方法。
8.利用表达的海藻糖合成酶和水解酶进行生产和水解反应，产生海藻糖。
9.对产生的海藻糖进行纯化和分析，如利用薄层色谱等方法进行分离和鉴定。
10.对纯化的产品进行测试和应用，包括对产品质量的评估和性能的测试。
11.进一步对基因和表达系统进行优化，提高表达水平和海藻糖产量。
12.总结研究成果，发表论文或专利。