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乳抗氧化肽的分离、纯化及生物活性研究的中期报告
本次研究以牛乳为原料，采用超滤、离心、酸解、酶法及层析技术等方法，对乳中的抗氧化肽进行了分离、纯化及生物活性研究。以下是实验进展情况的中期报告：
一、样品制备及分离纯化
1.1超滤分离
首先对牛乳进行超滤，得到具有相似分子量范围(1000~3000Da)的分离物，经过总氮检测表明含氮量较高，可能具有生物活性成分。将其保存在冰箱内。
1.2酸解法
取超滤液，以1mol/LHCl溶液进行酸解处理。通过离心、过滤、调节pH值等多次操作，得到具有较高生物活性的样品。
1.3酶法
将酸解液经过消化酶逐一消化，制备成多种肽类混合液，并对其进行生物活性测定。
二、生物活性测定
2.1氧自由基(ROS)清除实验
以乳悬液的样品为测试物，测定其对氧自由基的清除能力。结果表明，样品的清除率随着样品浓度的升高而增加，且具有一定的浓度依赖性。
2.2还原力实验
对样品的还原力进行了测定，样品呈现出一定的还原力，且具有显著浓度依赖性。
2.3抗氧化酶活性测定
将不同浓度的样品添加至抗氧化酶反应体系中，测定样品对SOD、CAT等酶的活化效果。结果显示其具有一定的提高酶活性的效果。
三、下一步研究计划
下一步将对纯化获得的乳抗氧化肽进行肽序列分析及3D构建，和进行其他的生物活性研究，如细胞实验、物质代谢等，以期更具体的了解其生物功能及作用机理。