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人源β-防御素-6的原核表达及纯化的中期报告.docx

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人源β-防御素-6的原核表达及纯化的中期报告 人源β-防御素-6（Humanβ-Defensin-6，HBD6）是一种天然免疫分子，具有广谱的抗菌活性。本研究旨在构建HBD6的原核表达系统，并对其进行纯化和活性鉴定。 首先，我们将HBD6基因克隆到原核表达载体pET-28a中，经过PCR验证后转化到大肠杆菌BL21（DE3）菌株中。利用IPTG诱导表达后，我们通过SDS-PAGE和Westernblot分析，发现在重组菌中成功表达了HBD6。 接下来，我们对表达的HBD6进行了纯化。采用Ni-NTA亲和层析法纯化重组HBD6，并经过再生反渗透脱盐和凝胶过滤层析进一步提高纯度。经过SDS-PAGE和透射电镜观察，我们发现纯化后的HBD6单一、纯度较高。 最后，我们进行了HBD6的抗菌活性鉴定。通过最小抑菌浓度试验，发现纯化的HBD6对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌等多种菌株均具有较强的抗菌活性。 综上所述，我们成功构建了HBD6的原核表达系统，并通过纯化和活性鉴定验证了其抗菌活性，为进一步研究HBD6的生物学功能奠定了基础。