受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因的克隆及初步分析的任务书.docx

受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因的克隆及初步分析的任务书
任务简述：
本次任务是对于受水稻纹枯病菌诱导表达的OsWRKY基因的克隆及初步分析。任务主要分为以下几个步骤：
1.设计引物：根据OsWRKY基因序列，设计克隆OsWRKY基因的引物。
2.克隆OsWRKY基因：从水稻中提取RNA，利用RT-PCR技术，扩增出OsWRKY基因，并通过电泳检测确认克隆的正确性。
3.质粒构建：将克隆得到的OsWRKY基因克隆至质粒中。
4.菌株转化：将构建得到的质粒转化至大肠杆菌中，利用选择培养基筛选转化成功的菌株。
5.酵母菌转化：将构建好的质粒转化入酵母菌中，进行酵母菌转化实验，利用蓝白斑筛选转化成功的酵母菌株。
6.基因表达分析：通过荧光素酶活性的检测，分析转化的菌株以及酵母菌株表达OsWRKY基因的情况。
7.初步功能分析：利用qPCR技术，分析表达OsWRKY基因的水稻植株与野生型植株的差异，初步探究OsWRKY基因的功能。
任务要求：
1.找到已公布的OsWRKY基因序列，并根据序列信息设计出引物。
2.获取水稻样本，提取出RNA进行克隆实验。
3.完成质粒构建、大肠杆菌转化、酵母菌转化等实验条件的准备，并进行转化实验。
4.通过相应分子生物学技术对转化的菌株及酵母菌株进行鉴定，并分析其表达OsWRKY基因的情况。
5.利用qPCR技术探究OsWRKY基因的功能，初步分析OsWRKY基因在水稻中的作用机制。
6.注意实验过程中的安全问题，对实验用品进行正确处理、消毒，并做好实验记录和数据分析。