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18个水稻WRKY基因的克隆和OsWRKY21功能分析的中期报告 本项研究旨在克隆18个水稻WRKY基因并对其中的OsWRKY21基因进行功能分析。现已完成部分实验,具体进展如下: 1.克隆18个水稻WRKY基因 通过参考水稻基因组数据库和已有的研究文献,我们设计了18对引物并使用RT-PCR技术在水稻品种中克隆出了18个WRKY基因的全长序列。这些基因分别是:OsWRKY1、OsWRKY3、OsWRKY8、OsWRKY11、OsWRKY13、OsWRKY15、OsWRKY16、OsWRKY25、OsWRKY26、OsWRKY30、OsWRKY31、OsWRKY33、OsWRKY41、OsWRKY45、OsWRKY51、OsWRKY53、OsWRKY62和OsWRKY63。这些基因的序列已经验证,并且已上传到基因库。 2.OsWRKY21基因表达和亚细胞定位分析 我们在水稻中检测到OsWRKY21基因的表达,在根、茎、叶和花中都有表达,其中在根中表达量最高。使用融合GFP基因的OsWRKY21蛋白进行显微镜下的观察,发现该蛋白主要定位在细胞核中。 3.OsWRKY21基因的功能分析 我们将构建了过表达OsWRKY21基因的转基因水稻,以及沉默了OsWRKY21基因的水稻。目前已完成对转基因水稻和控制组进行了形态学和分子学分析,发现转基因水稻的生长速度相对较快,并具有较高的抗病性。 目前,我们正在进行沉默OsWRKY21基因的水稻的形态学和分子学分析,以及进一步探索OsWRKY21在水稻中的生理和分子机制。 总体上,这项研究在水稻WRKY基因家族的克隆和OsWRKY21功能分析上取得了初步进展。我们将继续深入研究,探索WRKY基因家族在水稻中的作用机制和应用价值。