Thanatin的原核表达、纯化及其抗菌活性的检测的中期报告.docx

Thanatin的原核表达、纯化及其抗菌活性的检测的中期报告
该项目旨在克隆、表达、纯化和检测Thanatin蛋白的抗菌活性。在过去的研究中，我们成功地将Thanatin基因克隆到表达载体pET-30a(+)中，并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。根据SDS-PAGE结果，我们获得了一条分子量为1.8kDa的蛋白带，这与Thanatin的预期分子量相同。
接下来，我们进行了蛋白的纯化。在经过初步检测后，我们选择了两种纯化方法，即阳离子交换层析和透析。通过阳离子交换层析，我们获得了高纯度的Thanatin蛋白，并通过SDS-PAGE进行了检测。定量结果表明，Thanatin蛋白的浓度为1.5mg/mL。
为了检测Thanatin蛋白的抗菌活性，我们选择了克隆表达大肠杆菌。通过菌落形态观察和菌落计数，我们发现Thanatin蛋白对大肠杆菌有抗菌作用。同时，我们观察到Thanatin蛋白对其他菌株（如金黄色葡萄球菌和链球菌等）也具有抑菌作用。这表明Thanatin蛋白确实具有广谱的抗菌活性。
未来的工作将继续对Thanatin蛋白的抗菌机制进行研究，包括对其靶点的鉴定和分子机制的深入探讨。同时，我们将进一步优化蛋白的表达和纯化条件，以提高其产量和纯度。