一种檀香组织培养快速繁殖育苗方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109744142A(43)申请公布日2019.05.14(21)申请号201710718937.6A01G17/00(2006.01)(22)申请日2017.08.21(71)申请人中国林业科学研究院热带林业研究所地址510520广东省广州市天河区龙洞街道广汕一路682号(72)发明人刘英曾炳山裘珍飞(74)专利代理机构北京科家知识产权代理事务所(普通合伙)11427代理人陈娟(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G24/28(2018.01)A01G24/15(2018.01)A01G24/10(2018.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称一种檀香组织培养快速繁殖育苗方法(57)摘要本发明提供了一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，包括如下步骤，S1、萌芽条的培养；S2、外植体消毒；S3、丛芽诱导；S4、继代培养；S5、预生根培养；S6、炼苗培养；S7、微扦插移植。本发明以1/3轮伐期以上的种源试验林的优树为培养材料，组培快繁为基础，预生根瓶苗为切入点，通过调整大量元素配比、激素浓度及配比、蔗糖浓度、移植介基及配比、水分控制及养分补充、病害控制等系列技术方法，本发明提供了一套檀香微扦插生产配套技术，解决了檀香生根培养不生根和落叶死亡的问题，实现预生根培养45天后，98％的瓶苗高度达3.5cm以上，生长健壮不落叶；实现微扦插预生根瓶苗生根率达到60％以上；实现无性系组培苗木的规模化生产。CN109744142ACN109744142A权利要求书1/2页1.一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、萌芽条的培养：于秋冬季节，在树龄超过1/3轮伐期的优良种源林中根据树高、胸径和共生树数量等指标评选优树，选择优树上光照条件好，生长健壮的最接近地面的枝条进行截枝促萌处理，截枝保留40～60cm长度，去除截枝上的原萌条，次年春萌芽率可达95％；S2、外植体消毒：在春夏季节，采集S1处理后萌发的20～40cm长优树萌条，剪除叶片留叶柄，1～24h内采用超声波机清水清洗10min，再在超静工作台上，以0.1g/L的汞消毒13～20min,消毒成功率可达60％；S3、丛芽诱导：消毒后的外植体，接入丛芽诱导培养基中诱导丛芽萌发，培养基pH值为5.8～6.2，包括改良的MS的元素，其含量为：NH4NO3350～550mg/L、KH2PO4170～255mg/L、MgSO4.7H2O370～550mg/L、KNO31900mg/L、CaCl2400mg/L、Ca(NO3)2.4H2O750mg/L、(NH4)2SO4260mg/L、微量元素1.5MS、有机质1.0MS、激素6BA0.10～0.2mg/L、IBA0.2mg/L、蔗糖30～35mg/L；S4、继代培养：丛芽诱导出来后，转入檀香继代增殖培养基，培养条件除激素浓度变动外，其他条件同步骤S3，繁殖倍数可达2.5倍以上，扩繁为主的继代培养周期为30～35天，一边扩繁一边产苗的继代培养周期为40～50天。继代培养基的激素变动为：激素6BA0.05～0.15mg/L、IBA0.10～0.15mg/L；S5、预生根培养：选取继代培养中高度在2.5cm以上，叶片充分展开的芽苗接入预生根培养基进行预生根培养，培养25～35天后，转入炼苗温室中炼苗；预生根培养基为改良2的MS培养基，其含量为：NH4NO3560～1320mg/L、KH2PO4256～340mg/L、MgSO47H2O148mg/L、KNO3760～1520mg/L、CaCl2130mg/L、Ca(NO3)24H2O750mg/L、微量元素1.0MS、有机质1.0MS、激素GGR0.4mg/L、IBA0.2mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖40～50mg/L。S6、炼苗培养：预生根培养时间因季节而异，为25～35天，随后，无需转接培养基，直接转入光照强度为5000～10000Lx的炼苗温室中炼苗，炼苗时间为15～30天。当芽苗高度≥4cm以上时，及时移植，减少炼苗时间过长，污染率升高，降低瓶苗出瓶率；S7、微扦插移植：适宜于预生根芽苗微扦插移植的基质配方：蛭石：泥碳土：黄心土的体积比为8：1：1。微扦插前用0.5％高锰酸钾消毒基质，微扦插后每星期使用不同杀菌剂进行病害防治。因檀香组培芽苗微扦插生根时间较长，常规施肥不能及时补充营养的特点，预生根的芽苗移植20天后，每星期叶面喷施1次1/4MS～1/3MS的大量元素溶液补充养分。移植23天后，每10天叶面喷施1次1.5～2.0MS微量元素溶液。檀香组培芽苗微扦插移植后，前期应注意保湿和多喷雾，并覆盖遮阳网降低光照强度，随后逐渐减少喷雾次数和加强光照。微扦插移植2