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米渣蛋白纯化及改性研究的中期报告 本篇报告主要介绍关于米渣蛋白的纯化和改性过程的中期研究进展,包括实验设计、方法和结果。 一、实验设计 1.1实验目的 本实验的目的是纯化并改性米渣蛋白,以便更好地利用和开发其潜在的应用价值。具体目标包括: 1)通过不同的纯化方法获得高纯度的米渣蛋白。 2)通过改变PH值、温度和添加荧光素等方法改性米渣蛋白的物化性质。 3)对改性后的米渣蛋白进行检测和分析。 1.2实验步骤 1)米渣蛋白的提取和预处理 采用颗粒筛分法将米渣样品分离,然后用0.9%的NaCl溶液提取米渣蛋白,过滤后冷藏保存。 2)米渣蛋白的纯化 采用离子交换层析法纯化米渣蛋白,首先将混合物加入到强阳离子交换柱中,洗脱之后再用弱阴离子交换柱进一步纯化。用SDS-PAGE测定蛋白质含量和纯度。 3)米渣蛋白的改性 通过改变PH值、温度和添加荧光素等方法改性米渣蛋白的物化性质。其中,pH值的调节范围为6.0至12.0,温度范围为37°C至80°C。 4)蛋白质表征 使用UV-Vis吸收光谱和荧光光谱对改性后的米渣蛋白进行表征。 二、方法 2.1米渣蛋白的提取和预处理 将米渣样品通过颗粒筛分法分离,然后将分离出的米渣样品用0.9%的NaCl溶液提取蛋白,过滤冷藏保存。 2.2米渣蛋白的纯化 采用离子交换层析法纯化米渣蛋白,首先将混合物加入强阳离子交换柱中,洗脱之后再用弱阴离子交换柱进一步纯化。用SDS-PAGE测定蛋白质含量和纯度。 2.3米渣蛋白的改性 通过改变PH值、温度和添加荧光素等方法改性米渣蛋白的物化性质。pH值的调节范围为6.0至12.0,温度范围为37°C至80°C。 2.4蛋白质表征 使用UV-Vis吸收光谱和荧光光谱对改性后的米渣蛋白进行表征。 三、结果 3.1米渣蛋白的纯化 采用离子交换层析法将米渣蛋白从原料中纯化出来。SDS-PAGE测定结果显示,所得蛋白质为单一的带状条带,证明成功纯化出了米渣蛋白。 3.2米渣蛋白的改性 经过pH值、温度和添加荧光素等改性方法后,米渣蛋白的物化性质发生了明显变化。例如,pH值为7.0至10.0时,米渣蛋白的溶解度显著提高,且荧光强度增强。 3.3蛋白质表征 UV-Vis吸收谱显示,米渣蛋白在280nm处有明显吸收峰,且改性前后吸收峰位置和峰形未发生明显变化。荧光光谱显示,添加荧光素后,米渣蛋白的荧光强度均有明显增强。 四、结论 本次实验成功纯化出了高纯度的米渣蛋白,并通过改变PH值、温度和添加荧光素等方法改性米渣蛋白,从而改变了其物化性质,并且通过多种方法对改性后的米渣蛋白进行了表征和分析。这些结果为进一步研究米渣蛋白的应用价值提供了基础数据和理论支持。