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多酚氧化酶的研究现状【精品多篇】

[导读]多酚氧化酶的研究现状【精品多篇】为的会员投稿推荐，但愿对你的学习工作带来帮助。PPO的催化机理篇一多酚氧化酶(PolyphenolOxidase，PPO)是从真菌到植物乃至哺乳动物体内都广泛存在的一类铜蛋白，它能有效催化多酚类化合物氧化形成相应的醒类物质。在茶儿茶素氧化PPO底物儿茶素(catechin)类能和许多金属离子络合，Cu2+离子形成的配位物中的配位数为4或6，可以从配位体的配位键来阐明PPO的催化生化机理。PPO的多肽链通过自身的折叠卷曲，形成具有一定构象的高级结构。Cu2+与多肽链上的氨基酸残基以配位键相连，主要有His-His和Cys-His残基作为铜离子的配基，形成具有特定立体结构的活性部位。当邻苯二酚基和底物存在时，由于其“靠近”及“定向”效应，使多肽链和底物的空间构象发生改变，相互契合，从而使底物进入活性中心，邻苯二酚基上的二个羟基与多肽链上的氨基酸残基以氢键相连，形成酶与底物的复合物，由于复合物的不稳定性，多肽链构象发生扭曲，氢键断裂，H被附着在多肽链上，酶与底物不再契合，两者都同时发生构象转变，于是产物脱离了活性部位，成为邻醌。邻醌可发生一系列次生氧化作用，形成了多种氧化产物。酶又通过脱氢作用，发生构象回转，恢复以前的天然构象，重新成为具有催化能力的蛋白质。PPO的生理功能篇二高等植物组织发生褐变主要是PPO活动的结果。PPO催化单酚羟基化为邻二酚，二羟酚氧化为邻醌。醌聚合并与细胞内蛋白质的氨基酸反应，结果发生黑色或褐色色素沉淀，最终导致水果、蔬菜等经济作物营养丢失和经济损失。PPO作为一种氧化还原酶还在光合作用中发挥作用。如调节叶绿体中有害的光氧化反应速度，参与其中电子传递；PPO还可促进伤口的愈合，也可增加植物对病原体的抗性。如烟草对炭疽病、黄瓜对黑星病、苹果对轮纹病、棉苗对枯萎病菌、水稻对白叶枯病菌和细菌性条斑病以及番茄对小昆虫的抗性等。PPO的`作用方式有：1、如番茄的具腺毛状体中含有大量PPO，PPO具有存在于表皮中、活化态和可溶性的特性，在毛状体介导的抗病过程中起作用[12]。2、通过醌共价调节亲核氨基酸形成抗营养机制，直接抵御昆虫和病原体[13]。3、醌的毒性直接发挥抗病作用。4、如番茄中PPO克隆的反义表达可对基因家族的各成员进行负调节，对病原体产生超敏感性（感受性过敏）[14]。5、邻醌的次生反应所产生的黑色素的痂可阻止感染的扩散[15]。PPO与水果和作物的褐变有关，为了防止水果褐变保持水果的新鲜性，生产上运用多种方法来降低水果中的PPO含量，例如涂以抗坏血酸、柠檬酸为主剂的复合护色剂，杏用沸水烫4min基本控制PPO活性，对莱阳梨进行套袋抑制PPO活性等。多酚氧化酶PPO的结构特性篇三PPO是一种含有Cu2+离子的结构蛋白，可以催化酚类上的羟基，使之转化为醌或催化多酚类变为氧合醌。因为醌类具有较强的电化学性质，会发生自动氧化、蛋白质的亲核聚合反应及一些二级反应，而这些反应都会导致酶促褐变反应的发生。植物中的PPO包括一些由核编码的，多基因的家族。在蕃茄中，已有几个PPO的基因被分离出来，并从结构上将其分为三组。在马铃薯中，有4条独立的cDNA被克隆，每一个都显示了独特的空间图景。在扁豆中，有三条与PPO有关的cDNA克隆已被建立。所有的PPO基因都有两个区域，一是与Cu有关的编码区，另一个是引导肽(transitpeptide)，以便能进入质体。PPO的前体（含有引导肽的）约60-75KDa，而成熟的PPO（去除了引导肽的有活性的形式）约45-69KDa，由于这种潜在的酶活性的存在，使PPO活性的问题研究起来十分复杂。未激活的PPO可被陈化作用、加盐、去污剂（如SDS）、蛋白酶切或尿素的加入等激活。PPO活性的测定方法篇四测定多酚氧化酶活性的方法有：检压法、极谱电极法、比色法、碘量滴定法等[19]。最早是将酚或邻苯二酚作为底物用滴定法来测定多酚氧化酶活性，后来发现用极谱电极法测定O2消耗更精确一些[20]。但是，无论是滴定法还是极谱电极法都必须经过种子研磨的过程，为了测定的省时方便，Kruger[21]首创了无须研磨种子就可以测出小麦多酚氧化酶活性的方法:种子在水中浸泡16h，然后加入邻苯二酚，反应30min后用动态的微盘计数器测溶液的颜色变化。将这种方法与研磨种子氧电极法比较，相关系数为0.85。伴随着科技的发展和分光光度计的应用，Anderson[22]将整粒种子测定方法做了进一步改进:3～5个整籽粒或0.4g被钳碎的种子放入离心管中，加入用50mMMOPS缓冲液配制的L-DO-PA，室温振荡反应30min或37℃振摇5min后过滤，然后在分光光度计下测定475nm吸收值，这种方法与研磨种子氧电极法比较，相关系数为0.86。PPO活