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设计作品名称黄芩中黄芩苷的提取工艺设计 一、概述 (一)黄芩苷简介 黄芩苷(baicalin),别名贝加灵,是从双子叶唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensisGeorgi)直根中主根干燥根中提取分离出来的一种黄酮类有效化合物,在常 温下是淡黄色粉末状,味苦,性寒;遇到三氯化铁呈现绿色,遇到乙酸铅可生成橙色的沉 淀物;不溶于乙醇、甲醇、丙酮、微溶于氯仿和硝基苯、几本不与水相溶,但却能与热乙 酸相溶。溶于碱和氨水中先变黄色,再变成深棕色。具有显著的生物活性因子,利于抑菌、 降底胆固醇、利尿、抗炎、抗血栓形成、泻火解毒、止血、缓解哮喘、安胎、抗变态反 应及解痉作用,也成为哺乳动物肝脏涎酶的特异性抑制剂,具有可以作为调节某些疾病的 作用,也具有较强的抵抗癌症反应生理功效。 (二)药理用途 抗肿瘤作用:在体外,黄芩苷对S180和Hep-A-22肿瘤细胞的增长具有十分显 著和良好的抑制作用,伴随着药物浓度逐渐的增加,抑制肿瘤的作用也会逐渐变强,而且 这会很好的延长Hep-A-22小鼠的存活时间。 对肝脏功能损伤具有一定保护作用:用CCl4和D-半乳糖所制作出来的小鼠急性 肝脏损伤模型,用于测定小鼠的血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性因子以 及丙二醛的含量;用比色分析法测定小鼠的血清天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶的活性因 子。结果表明黄芩苷可以有效降低因CCl4和D-半乳糖所导致的急性肝脏损伤小鼠丙氨 酸转氨酶(AST)和血清天冬氨酸转氨酶(ALT)的升高;对急性肝脏损伤小鼠谷胱甘肽过氧 化物酶(GSH-Px)、血清超氧化物歧化酶(SOD)的活性因子有显而易见的升高作用,并且 成功的降低丙二醛(MDA)在小鼠体内的含量。结果表明黄芩苷对CCl4、D-半乳糖所导致 小鼠急性肝脏损伤有一定显著保护作用。实验中给药组SOD、GSH-Px较模型组显著升高, 而MDA含量显著降低,也说明黄芩苷对保护肝脏机制与其对抗自由基脂质过氧化有着十分 密切的关联。 对糖尿病肾病具有一定改善作用:糖尿病肾病(DN)是糖尿病中(DM)最为常见的微血 管并发症之一,这一种发病机制的研究一直都是国内外对糖尿病这一领域的热点。高血糖 是引起糖尿病肾病的始动因素,并通过肌体内的这一系列过程从而引发肌体内部的炎症反 应并伴随着氧化应激反应,从而导致肾脏的局部细胞因网络活化而引发的DN。整个过程 中,肾素-血管紧张素系统在这中发挥了至关重要作用,其中因为血管紧张素II(AngII) 是这个系统里面最有活性的因子,与DN的关系十分密切。所以再经过黄芩苷治疗之后, AngII明显恢复它的稳定,这就是黄芩苷对DN大鼠肾功能保护的关键,即黄芩苷通过降 低高血糖状态下肾素血管紧张素系(RAS)的活性之后,从而很好的治疗或保护DN大鼠的 肾脏功能。除此之外,黄芩苷还降低AngII后接着可以通过降低血压和肾小球内压、从 而达到改善血液内的环境以及循环功能等恢复肾功能的作用。 二、黄芩苷提取方案:先超声后回流提取法 (一)黄芩苷提取工艺流程 1.浸润 将黄芩粗粉放入4倍量60%乙醇浸泡过夜。 2.超声 将浸润后的黄芩粗粉,再以1:20的原药材与醇提取液配比,超声提取30分钟。 3.回流提取 将超声后的醇提液及药材90℃水浴回流提取三次,这三次的加醇量依次分别 为4,3,2倍,每次30分钟,过滤,合并滤液,并处理药渣。 4.酸沉 将合并的滤液回收乙醇至没有醇味,剩下的水液加热到80℃,盐酸pH值为1~2, 保温30分钟,室温静置24小时,沉淀,离心得到沉淀和上清液,沉淀后加10倍水搅拌 成混悬液,20%NaOH调pH值为7,静置。 5.离心酸沉 离心得到沉淀和上清,将上清加热40℃,搅拌下加入等体积乙醇(1:1),混 匀,静置,离心得到上清液和沉淀,上清液盐酸调pH值为1~2,80℃保温30分钟,室温 静置,沉淀,离心得到上清液和沉淀。 6.干燥 最后将沉淀干燥就可得粗品黄芩苷。 4.黄芩苷精品 将所得黄芩苷粗品经水洗后,再经醇洗,干燥得黄芩苷精品。 (二)提取过程中的注意事项 1.料液比的确定:通过以下实验来确定料液比为,称取相同等份的黄芩提前放入水 中预浸2小时,再以水为提取液,以1∶20的原材料和水液比,超声时间为30分钟,超 声功率为200W。 不同料液比对黄芩苷得率的影响见图1。 图1不同料液比对黄芩苷得率的影响 由图1可知,黄芩苷得会随着料液比的减少不断增大,所以黄芩苷得率也会伴随 提取液量的增加不断增大率;料液比为1∶20的时候达到最大,之后料液比不管再怎么减 小时,得率基本上是保持不变的,这可能是因为提取液浓度达到一定时,黄芩苷的溶解度 不会随其量的小幅度增加而增加,故确定料液比为1∶20。 2.超声时间的