糖基化蛋白的分离纯化.ppt
天马****23
亲,该文档总共24页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~
相关资料
糖基化蛋白的分离纯化.ppt
根据糖肽链的类型,蛋白质糖基化可以分为四类主要内容糖基化蛋白质的研究方案糖基化蛋白的鉴定方法放射性标记法分子荧光标记法电泳法凝集素标记法抗体标记法化学酵素法MALDI-TOF是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的标准缩写。第一部分(MALDI-----matrix-assistedlaserdesorptionionization)指MALDI离子源,基本原理是将分析物分散在基质分子(尼古丁酸及其同系物)中并形成晶体,当用激光(337nm的氮激光)照射晶体时,基质分子吸收激光能量
重组蛋白的分离纯化.ppt
重组蛋白的分离纯化基因表达体系大肠杆菌(Escherichiacoli)枯草杆菌(Bacillussubtilis)其他真核细胞表达体系酵母细胞昆虫细胞CHO细胞动物乳腺组织鸟类输卵管组织植物组织体系选择重组蛋白的分离纯化策略针对不同的产物表达形式采取不同的策略针对不同性质的重组蛋白选择不同的层析类型多种分离纯化技术的联合运用合适分离纯化介质的选择ProteinpurificationAboutgelfiltration21分泌型战略表达重组蛋白的分离纯化策略外源基因的表达产物,通过运输或分泌的方式穿过细
表达蛋白的分离与纯化;EMSA.docx
表达蛋白的分离与纯化大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。现已有多种方法可以利用,蛋白质纯化策略也已实际可行。目前,待研究蛋白或酶的基因的获得已是相当普遍的事。可诱导表达系统特别是Studier等发展的以噬菌体T7RNA聚合酶为基础的表达系统的出现使人们能近乎常规地获得高表达水平的蛋白,表达水平可达细胞蛋白的2%以上,有些甚至高达50%
GFP蛋白的表达、分离与纯化.ppt
GFP蛋白的表达、分离与纯化GFP表达质粒的转化(pGLO→Top10)疏水相互作用层析课堂提问——每人2-3个问题;权重:30%总结报告——PPT,5人一组,10分钟;权重:30%实验报告——权重:40%要求:标准的论文格式:中、英文标题和摘要;前言;材料与方法;结果;讨论;参考文献。Day0:准备实验材料Day1:GFP表达质粒的提取;Top10感受态细胞的制备;GFP表达质粒转化Top10。Day2:GFP表达菌株扩大培养;GFP的诱导表达。Day3:表达菌株的收集、破碎;硫酸铵沉淀所用浓度的确定;
蛋白质的分离纯化.ppt
1透析和超过滤基本原理:两相:固定相(静相)和流动相(动相)有效分配系数:层析按流动相:气相、液相色谱等;按操作形式不同:纸层析、薄层层析、柱层析等;按分离机制:凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、吸附层析等。3.1纸层析(Filter-paperchromatography)3.2薄层层析(Thin-layerchromatography)3.3柱层析①凝胶过滤层析(分子排阻层析、分子筛层析)(Gel-filtrationchromatography)介质:凝胶颗粒(多孔的网状结构)交联度或孔度(网孔大小