转基因动物和克隆动物.ppt

转基因动物转基因动物技术转基因动物和克隆动物（二）转基因动物的命名(2)方式
转基因符号通常冠以Tg字头。
随后的一个字母（X）表示DNA插入的方式：
H代表同源重组；
R代表经过逆转录病毒载体感染的插入；
N代表非同源插入。（3）插入片段标示
An匿名序列；Ge基因组；
Im插入突变；Nc非编码序列；
Rp报告基因；Sn合成序列；
Et增强子捕获装置；
Pt启动子捕获装置。2.举例
C57BL/6J-TgN(CD8Ge)23Jwg：
来源于美国杰克逊研究所（J）的C57BL/6品系小鼠被转入人的CD8基因组（Ge）；转基因在JonW.Gordon(Jwg)实验室完成，获取于一系列显微注射后得到的序号为23的小鼠。二、转基因动物的基本原理和方法
1.外源目的基因的分离
2.外源目的基因与转性基因表达启动子、增强子、报告基因等构件的拼接重组
3.重组DNA导入生殖细胞或胚胎干细胞
4.胚胎移植技术
5.鉴定及筛选
6.目的基因整合率及表达效率的检测1.采取受精卵
采取受精卵的方法分为获得自然排卵的受精卵的方法和以激素诱发排卵的方法，还有采取未受精卵，然后在体外受精的方法。
2.向受精卵雄性原核注入DNA溶液
通过微分干涉显微镜观察受精卵，会看到两个大的原核。两个核不久即可融合，接着核膜消失。雄性原核要比雌性原核能容纳更多的DNA溶液，一般是向雄性原核注入DNA溶液。
3.向假妊雌小鼠移植
（1）假妊雌小鼠的制作
（2）将操作卵移植至输卵管
4.转基因动物的检测Ⅱ逆转录病毒法Ⅱ逆转录病毒法Ⅲ胚胎干细胞法利用胚胎干细胞法制备转基因小鼠的过程在胚胎干细胞基础上的基因打靶技术在胚胎干细胞基础上的基因打靶技术Ⅳ精子载体法Ⅴ体细胞核移植法Ⅵ受体介导法提高转基因效率的策略三、转基因动物的应用四、克隆动物五、克隆动物的基本方法（三）细胞核和克隆的分类
按使用的细胞性质不同克隆可分为：
①胚性克隆用未分化的胚胎进行胚胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植、胚胎成纤维细胞核移植、胚胎分割或胚胎嵌合等操作培育出新个体；
②无性克隆用已分化的体细胞进行核移植培育出新个体，亦称体细胞克隆。当前谈论的克隆多指体细胞克隆。

根据供核体细胞的不同，动物克隆又可分为两种类型：①同种体细胞克隆用相同物种体细胞进行核移植；
②异种体细胞克隆将一种动物的体细胞核移植到另一种动物的去核（遗传物质）卵母细胞中。按研究目的不同，克隆可分为生殖性克隆与治疗性克隆；生殖性克隆指无性繁殖新个体，治疗性克隆指用克隆技术培育出某些组织器官用于医疗。六、克隆动物的应用技术优点技术的忧患