绿色荧光蛋白的基因克隆及表达.doc

学号08114010214编号2011140214班级生科0802

HUBEINORMALUNIVERSITY

分子生物学综合实验论文

论文题目绿色荧光蛋白的基因克隆和表达作者姓名饶慧指导教师王友如所在院系生命科学学院专业名称生物科学完成时间2011.5.30
目录
TOC\o"1-3"\h\z\uHYPERLINK\l"_Toc297798354"引言 PAGEREF_Toc297798354\h1
HYPERLINK\l"_Toc297798355"1材料与方法 PAGEREF_Toc297798355\h4
HYPERLINK\l"_Toc297798356"1.1材料 PAGEREF_Toc297798356\h4
HYPERLINK\l"_Toc297798357"1.1.1实验材料 PAGEREF_Toc297798357\h4
HYPERLINK\l"_Toc297798358"1.1.2仪器设备 PAGEREF_Toc297798358\h4
HYPERLINK\l"_Toc297798359"1.1.3试剂及溶液 PAGEREF_Toc297798359\h5
HYPERLINK\l"_Toc297798360"1.2方法 PAGEREF_Toc297798360\h7
HYPERLINK\l"_Toc297798361"1.2.1重组质粒的构建 PAGEREF_Toc297798361\h7
HYPERLINK\l"_Toc297798362"1.2.2DH-5α和BL-21感受态细胞的制备 PAGEREF_Toc297798362\h7
HYPERLINK\l"_Toc297798363"1.2.3感受态细胞的转化 PAGEREF_Toc297798363\h7
HYPERLINK\l"_Toc297798364"1.2.4碱法提质粒 PAGEREF_Toc297798364\h8
HYPERLINK\l"_Toc297798365"1.2.5酶切鉴定 PAGEREF_Toc297798365\h8
HYPERLINK\l"_Toc297798366"1.2.6琼脂糖凝胶电泳 PAGEREF_Toc297798366\h9
HYPERLINK\l"_Toc297798367"1.2.7PCR-聚合酶链式反应 PAGEREF_Toc297798367\h9
HYPERLINK\l"_Toc297798368"1.2.8pET-28a-GFP重组质粒转化到表达菌BL-21 PAGEREF_Toc297798368\h10
HYPERLINK\l"_Toc297798369"1.2.9重组绿色荧光蛋白（GFP）的诱导表达 PAGEREF_Toc297798369\h10
HYPERLINK\l"_Toc297798370"2结果与分析 PAGEREF_Toc297798370\h11
HYPERLINK\l"_Toc297798371"2.1提取质粒 PAGEREF_Toc297798371\h11
HYPERLINK\l"_Toc297798372"2.2重组质粒构建的鉴定 PAGEREF_Toc297798372\h12
HYPERLINK\l"_Toc297798373"2.3PCR检测结果 PAGEREF_Toc297798373\h12
HYPERLINK\l"_Toc297798374"2.4IPTG诱导表达 PAGEREF_Toc297798374\h13
HYPERLINK\l"_Toc297798375"3讨论 PAGEREF_Toc297798375\h14
HYPERLINK\l"_Toc297798376"参考文献 PAGEREF_Toc297798376\h16
HYPERLINK\l"_Toc297798377"致谢 PAGEREF_Toc297798377\h18

绿色荧光蛋白的基因克隆和表达研究
饶慧（指导老师：王友如）
（湖北师范学院生命科学学院生物科学0802班湖北黄石435002）
摘要：目的：研究绿色荧光蛋白（GreedFluorescentProtein，GFP）基因的基因克隆及在大肠杆菌中的表达。方法：通过分别将DH-5α(pEGFP-N3)和DH-5α(pET-28a)提取质粒、酶切并连接形成重组质粒pET-28a-GFP，将重组质粒导入E.coliDH-5