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·2011·14·繁殖·育种··39

乳腺上皮细胞体外培养的研究进展

郝明超，刘犇，樊江峰，王明亮，陈鹏，高旭东，余四九

（甘肃农业大学动物医学院，兰州730070）

中图分类号：Q813.1+3文献标识码：A文章编号：1004－4264（2011）14－0039－04

摘要：乳腺上皮细胞体外培养的成功对研究乳腺的生长发育、泌乳机制、乳腺肿瘤和癌变的发生及乳腺生物
反应器的应用等方面的研究都有重要的意义。具体来说，体外培养建立的乳腺上皮细胞系可为克隆和转基因
动物生产提供良好的核供体；分泌功能的乳腺上皮细胞系的建立为乳腺发育学、乳腺病理学、泌乳生物学研
究提供细胞模型。本文综述了国内外在此领域的研究进展，对乳腺上皮细胞的体外培养技术进行了总结为相
关领域的研究提供参考。
关键词：乳腺上皮细胞；细胞培养；细胞系；乳腺上皮干细胞

乳腺最主要的功能就是泌乳，乳腺上皮细胞是汁的功能。分泌上皮细胞在妊娠期分化增殖，在临
乳腺中唯一具有分泌功能的细胞，是研究乳腺泌乳近分娩时才具有分泌功能，且在干乳期存在退化现
机制的着手点[1]。但事实上，体内腺体组织整体和局象。啮齿类动物，腺泡上皮细胞会因哺乳刺激的停
部，包括细胞外基质（基质和基膜）和间充质细胞等止而大量凋亡[4]，导致腺泡结构退化为泌乳前的管
因素的复杂联系使鉴定和分析乳腺上皮细胞在乳状形态，而家畜泌乳期过后上皮细胞的退化程度相
腺发育、泌乳和非泌乳期中的变化和作用十分困对较小[5]，乳腺的退化是一个复杂的过程，涉及一系
难，体外乳腺上皮细胞培养体系的建立解决了这些列基因、激素和酶的参与[6]。
难题[2]。因为它细胞成分单一，脱离了体内复杂环境在分泌上皮细胞与基质之间有肌上皮细胞，肌
的干扰。目前体外培养的乳腺上皮细胞在研究乳腺上皮细胞在催产素的作用下收缩从而促进腺泡内
的发育机制、乳汁的分泌机制、乳腺生物反应器的乳汁排入腺导管。
构建和乳腺癌发生的研究中均有应用，并取得了一体外培养的乳腺上皮细胞只有分泌上皮细胞可
定的成果，本文主要从乳腺上皮细胞的类型、培养方以分泌乳蛋白和乳脂，因此要进行泌乳机制和乳腺
法、细胞系的建立、激素和细胞外基质对细胞的影反应器等方面的研究就必须分离纯化出具有泌乳
响、乳腺上皮干细胞等方面进行阐述，为成功建立正功能的分泌上皮细胞。一般培养的乳腺上皮细胞是
常的乳腺上皮细胞体外培养体系提供理论参考。分泌上皮、导管上皮和肌上皮三者的混合培养，差速
1体外培养乳腺上皮细胞的类型贴壁法和差时消化法很难将这三种上皮细胞分开，
泌乳期的乳腺实质组织包含三种类型的上皮只有经过梯度离心等处理方法才可将其分开。
细胞：分泌上皮细胞、导管上皮细胞和肌上皮细胞[3]。Zavizion等（1996）通过淋巴细胞分离液分离得到分
唯一具有泌乳功能的是分泌上皮细胞，分泌上皮细泌上皮细胞，并转染含有猿猴病毒（SV40）tsa58序列
胞在乳腺导管的末端单层排列，具有合成和分泌乳的质粒获得牛乳腺上皮细胞系BME-UV[5]。Zavizion
等（1992a）通过胶原酶消化并经过聚蔗糖甲基泛影
收稿日期：2011－03－15
酸盐密度梯度离心分离出牛肌上皮细胞并研究了
基金项目：国家科技支撑计划（2009BAC53B06）。，
作者简介：郝明超（1986-），男，河南焦作人，硕士，主要从事动物生体外培养条件下分泌上皮细胞与肌上皮细胞之间
殖生理与胚胎工程的研究。
通讯作者：余四九，教授。的相互作用。Pantschenko等（2000）在Zavizion所用
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方法基础上对第五代山羊上皮细胞混合培养物先3乳腺上皮细胞系的建立
用EDTA处理然后通过淋巴细胞分离液梯度离心，以体外培养的乳腺上皮细胞为试验模型，很大
使得分泌上皮细胞失去贴壁能力而纯化得到山羊程度上能够真实反映其在体内的生命活动情况，并
的肌上皮细胞系[3]。保持了组织特异性和细胞信号传导功能。虽然乳腺
2乳腺上皮细胞培养方法的研究上皮细胞的体外培养在啮齿类能很好实现，但对人
乳腺上皮细胞的培养方法主要有组织块法、酶和反刍动物等不能实验室饲养的动物来说，采集乳
消化法、机械法及从初乳中分离乳腺上皮细胞。腺组织进行细胞培养是非常困难的。而且，由于种
这些方法在实际中都有成功的例子，但各有利属特异性，啮齿类乳腺上皮的研究并不能反映人和
弊，要根据实验室条件和样品来源灵活选取。不管反刍动物乳腺的生物学特性。因此，为了研究乳腺
使用什么方法培养取材是培养成功的最关键步骤在上皮细胞水平上的调控机制，就必须建立乳腺上
之一，妊娠的中晚期或哺乳期，乳腺腺泡迅速发育皮细胞系，应用于人和动物正常乳腺细胞增殖分
分化，上皮细胞数量较多，功能较活跃，是取材的最化、细胞间的信息传递和乳腺癌