乙酸正丁酯中杂质的气相色谱分析.doc

实验四药物中残留有机溶剂的的气相色谱分析测定
——乙酸正丁酯中杂质的含量测定
一、目的要求
1.学习内标标准曲线法定量的基本原理和测定试样中杂质含量的方法。
2.复习并巩固气相色谱分析原理及其操作步骤。
3.掌握药物中常见有机残留溶剂的测定原理及其方法。
二、实验原理
对于试样中少量杂质的测定，或仅需要测定试样中某些组分时，可采用内标法定量。由实验二可知：当假定内标物的校正因子fs=1时，待测组分的含量可由下式求得。

从公式可知，若想求得待测组分的含量，需先求出待测组分的校正因子fi。
而内标标准曲线法，即配制一系列的标准溶液，测得相应的Ai/As，mi/ms。以Ai/As对mi/ms作标准曲线。这样就可以在无需预先测定fi的情况下，称取一定量的试样m试样和内标物ms，混合进样，根据Ai/As之值由标准曲线求得mi/ms，再根据公式
求得待测组分的质量分数wi。
三、仪器与试药
1.FL9500气相色谱仪
2.微量进样器（1L，0.5L，5L）
3.移液管（0.5mL、1mL、2mL）
4.高纯氮、高纯氢、低噪声空气净化源
5.异丙醇(=0.785g/cm3)、正庚烷(=0.68g/cm3)、环己烷(=0.779g/cm3)、甲醇(=0.7914g/cm3)、乙酸乙酯(=0.901g/cm3)、乙酸正丁酯(=0.8824g/cm3)均为分析纯
6.标准溶液按下表配制，分别置于5支25mL的容量瓶中，用乙酸正丁酯稀释，混匀备用。
编号m正庚烷/gm甲醇/gm异丙醇/gm环己烷/gm乙酸乙酯/g11.000.250.250.250.2521.000.500.500.500.5031.000.750.750.750.7541.001.001.001.001.0051.001.251.251.251.257.未知试样25mL（含1.0g正庚烷）。
四、实验条件
1.固定液：聚甲基硅烷（非极性）；色谱柱：毛细管0.32×30mm/m
2.柱温：70oC；气化室（辅助I）温度：150oC；检测器温度：150oC
3.载气：氮气；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）
4.进样量：标准溶液1L；未知试样0.5L；纯物质：0.2L。
五、实验内容及步骤
1.根据实验条件，按仪器操作步骤将色谱仪调节至可进样状态，待仪器的电路和气路系统达到平衡，色谱工作站的基线平直时，即可进样。
2.吸取各纯物质0.2L进样，记录各纯物质的保留时间。
3.吸取标准溶液1L进样，记录各组分的保留时间和色谱峰面积。
4.在同样条件下，吸取未知试液0.5L进样，记录各组分的保留时间和色谱峰面积。
六、数据记录及处理
1.记录纯物质的保留时间
甲醇异丙醇乙酸乙酯正庚烷环己烷乙酸正丁酯保留时间（min）2.记录标准溶液及未知试样各色谱图上各组分色谱峰面积
编号A甲醇（mV.s）A异丙醇（mV.s）A乙酸乙酯（mV.s）A环己烷（mV.s）A正庚烷（mV.s）12345未知３．以正庚烷为内标物质，计算mi/ms，Ai/As值
４．以Ai/As对mi/ms作图（Origin软件），绘制各组分的标准曲线，得到线性回归方程和线性相关系数。
5.根据未知试样Ai/As的值，由标准曲线计算出相应的mi/ms的值。
6.计算未知试样中甲醇、异丙醇、乙酸乙酯、环己烷的质量分数。
七、实验注意事项
进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净，清洗干净的微量注射器应该专用，不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用；
八、思考题
1.简要说出气相色谱的主要仪器部件，并画出其简易流程图。
2.实验中是否需要严格控制进样量，实验条件若有变化是否会影响测定结果，为什么？
3.内标标准曲线法中，是否需要校正因子，为什么？
4.根据纯物质的保留时间，确定各物质的沸点大小，并说明理由。
附录：FL9500气相色谱仪操作步骤
1.开N2钢瓶：1逆时针转动减压阀手柄至放松位置，此时减压阀处于关闭状态.
2逆时针打开钢瓶上的总阀门，并记录瓶中余气压力.
3顺时针旋紧减压阀，直至分压值达所需压力0.5Mpa.
2.接通电源，开净化器，三个全打开.
3.调节毛细管柱前压(主机顶上表压力)为0.06Mpa，开色谱仪上的两电源.
4.设置参数，选择优化条件：1.柱温(柱箱键).
2.汽化室(辅助I).
3.FID(检测器).
5.待所设参数达到设置条件时(显示键查看)，开H2钢瓶.
H2钢瓶的开法：1.逆时针转动减压阀手柄至放松位置.
2.逆时针打开钢瓶上的总阀门.
3.逆时针打开减压阀左边的小通道（使用阀）.
4.顺时针旋紧减压阀直至分压值达所需压力0.2Mpa.
6.调色谱仪主板上H2表Ⅱ的压力为0.1Mpa.
7.开低噪声空气净化源，调色谱仪主板上