食品质量与安全实验技术常见食品添加剂的测定武汉工业学院学习PPT教案.pptx

第三章常见食品添加剂的测定
食品添加剂的种类繁多。（22类）同一添加剂又有不同的分析方法，就具体的分析方法（食品不同，含量不同）甚多。但归纳起来主要有：滴定法、比色法、紫外分光光度法、荧光法、离子选择性电极法、色谱法（气相、液相、薄层）
食品中添加剂的测定与食品添加剂的测定的方法又有区别，一个需要进行（前处理）分离，一个则不需要，加之含量差异，分析方法有的采用不同的分析方法。一、防腐剂的测定
（一）碱滴定法测定苯甲酸
1、原理
样品加入饱和NaCI，在酸性条件下，用乙醚提取，去乙醚溶于中性乙醇，用碱滴定。
2、方法
（1）取样75g+7.5gNaCI→300ml烧杯溶解
（2）加入70ml饱和NaCI，用10%NaOH滴至碱性
（3）定溶250ml，摇、置2h
（4）过滤，取滤液100ml，置分液漏斗中，用1：1HCI滴至酸性。用190ml乙醚分三次抽提，静置。
（5）放出乙醚层，用水洗至中性。放入锥形瓶中，回收乙醚，加入50ml中性乙醇，10ml水，3滴酚酞，用0.05mol/LNaOH滴至终点。
（二）苯甲酸（钠）添加剂的测定
①要求:含量（％）≥99.5（苯甲酸钠≥99）（铅计）重金属％≤0.001……
②鉴别:1g样+20ml40g/LNaOH，加1滴100g/LFeCl3生成赭色↓
加HCl（1：3）白色↓（黄色火焰钠）
③测定
A.苯甲酸
称样0.25g加入中性50％乙醇溶液25ml，2滴酚酞，用NaOH滴至粉红色
b苯甲酸钠
提要：HCl+苯甲酸钠苯甲酸；不溶于水，易溶于乙醚，用乙醚萃取生成的苯甲酸，排除干扰。据用HCl的量计算苯甲酸钠含量称样1.5g+25ml水+50ml乙醚,10滴溴酚蓝;用0.5MHCl滴定,当水层显淡绿色为终点（黄—紫蓝，pH=3.0-4.6）
（三）气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、及其盐类(P147,151,152)
液相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、糖精(P152-154)
二、抗氧化剂的测定
1、BHA（叔丁基对羟基茴香醚）的测定
样品经石油醚萃取加入72％乙醇，使BHA转入乙醇相中，再与2.6—二氯醌氯亚胺—硼砂（缓冲）溶液的显色剂反应生成蓝色化合物。在λ=620nm处测吸光度A
2、BHT（2.6—二叔丁基对甲酚）的测定
用水蒸气法将BHT分离出来，溶解于甲醇中（甲醇液接收）加入邻联二茴香胺（另加亚硝酸钠溶液）生成橙红色化合物，用氯仿萃取，在λ=520nm处测吸光度A
3、可用气相色谱法测BHA、BHT三、发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定
1、亚硝酸盐的测定（P177）
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后在弱酸性条件下（HCl）亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化。
与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色染料。
λ=550nm处测吸光度A
2、硝酸盐的测定（镉柱法）（P179-180)
样品经用蛋白质沉淀剂（亚铁氰化钾+乙酸锑）沉淀蛋白质，除去上层脂肪。过滤后（用饱和硼砂溶液作提取剂）得提取液。通过镉柱在氯化胺缓冲液中
NO3-+Cd=CdO+NO2-用盐酸奈乙二胺法（比色）测NO2-总量
减去未经镉柱还原前的NO2-，则得由NO3-还原产生的NO2-量,乘以换算系数1.232得硝酸钠（NaNO3）含量四、漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定
测定方法有比色法、滴定法、色谱法
盐酸副玫瑰苯胺比色法（P170）
A.亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成络合物[HgCl2SO3]2-
Na2HgCl4+SO2+H2O→[HgCl2SO3]2-
B.与甲醛、对品红作用生成紫红色络合物-
聚玫瑰红甲基磺酸
C.λ=550nm处测A五、食品合成色素的测定
测定方法主要有：薄层层析法、高效液相色谱法
薄层层析法
在酸性条件下，用聚酰胺吸附水溶性合成色素，而与天然色素蛋白质、脂肪、淀粉等分离。
在碱性条件下，用适当溶液（如乙醇—氨）将其解吸。
用薄层层析法分离鉴别，与标准比较定性，测A定量。薄层层析分离及定性
a薄层板：1.6g聚酰胺+0.4g可溶性淀粉+2g硅胶G+15ml水研匀、铺在玻璃板上（0.3mm厚）凉干，80℃1h干燥器中
b点样：用微量注射器或毛细管将样液点于薄层板上（离底2cm左右2cm线宽＜2mm）成一条底边的线
c展开：层析缸内放入展开剂（如苋菜红、胭脂红用甲醇：乙二胺：氨水=10：3：4）
将薄层板下端浸入溶剂0.5-1cm左右，放约1h（色素明显分开），取出晾干
d比移值Rf的测定：可用纸层析（层析纸）测定方法基本同上a、b、c
Rf=

Rf=与标准样液Rf比较定性为何种色素定量测定
A刮下色斑（各条状）
移入漏斗（G3砂芯）用丙酮—氨水液解析抽滤
B用柠檬酸（20％）调pH=6
C定容
D在各色素λmax处测A，如柠檬黄428nm，胭脂红508nm
E作标准曲线
F计算色素（mg/Kg,L）=CV/W
c-从标准