模块四 食品卫生中细菌的检验.ppt

任务一鲜牛乳中菌落总数的测定一、实验原理二、实验步骤1ml①样品处理：以无菌操作,将检样25ml放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内放置适当数量的玻璃珠）,经充分振摇或研磨，制备成1:10的均匀稀释液。
②检样稀释：用1ml灭菌吸管,吸取1:10稀释液1m1,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水,充分振摇试管，使之混合均匀,制备成1:100的稀释液。另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,作10倍递增稀释液。③接种培养：根据对标本污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度,吸取该稀释度的吸管移1m1稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。稀释液移入平皿后,应即时将凉至46℃左右的平板计数琼脂培养基注入平皿约15m1,并转动平皿使其混合均匀。同时将平板计数琼脂培养基注入加有1m1稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置平板,置36±1℃温箱内培养48+2h。
④菌落计数：平板取出,计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每g(或ml)样品所含菌落总数。菌落计数以平板内菌落形成单位（CFU）表示。若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按照公式计算：
N=∑C/(n1+0.1n2)d
N-样品中菌落数
∑C-平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和
n1-第一适宜稀释度的平板数
n2-第二适宜稀释度的平板数
d-第一稀释度的稀释因子三注意事项思考任务二鲜牛乳中大肠菌群测定一、实验原理二、实验步骤③初发酵试验：选择三个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种三管。单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤培养基，各接种1mL。后置36+1℃恒温箱内培养24+2h,观察导管内是否有气泡产生。
④复发酵试验
初发酵若产气，则用接种环从所有产气的LST肉汤管中分别取培养物一环，接种于BGLB肉汤管中，置36+1℃恒温箱内培养48+2h,观察导管内是否有气泡产生，产气者为大肠菌群阳性管。
⑦MPN值的报告
记下发酵管中产气的阳性试管数，查附表即可得出样品中大肠菌群中的MPN值。注意事项思考