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·2446·煎塾ineTraditionalandHerbalDrugs第44卷第l7期2013年9月 ●药材与资源● 广藿香八氢番茄红素脱氢酶PcPDS1基因克隆和序列分析 欧阳蒲月,沈笑飞,曾少华,王瑛,莫小路 1.广东食品药品职业学院,广东广州510520 2.中国科学院武汉植物园,湖北武汉430074 3.中国科学院华南植物园,广东广州510650 摘要:目的为阐明广藿香类胡萝卜素代谢途径,克隆了广藿香Pogostemoncablin八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因,并对其进行相关生物信息学分析。方法搜索本课题组建立的广藿香转录组数据库,获得PDS基 因全长序列,并设计全长引物进行PCR验证;利用生物信息学软件对PDS基因进行生物信息学分析。结果本研究获得的 广藿香PDS基因命名为PcPDS1(GenBank登录号为KC854409),该基因全长1960个碱基,编码569个氨基酸。基于生物 信息软件分析了PcPDS1基因编码蛋白的理化特性。系统进化树分析结果表明,PcPDS1基因与黄龙胆G8ti“nlutea的PDS 序列同源性最高,与烟草Nicotianatabacum、番薯Ipomoeabatatas次之,与自然进化关系保持~致。结论成功克隆、分 析了广藿香PcPDS1基因。 关键词:广藿香;八氢番茄红素脱氢酶;PcPDS1基因;基因克隆;生物信息学分析 中图分类号:R282.12文献标志码:A文章编号:0253—2670(2013)17—2446.07 Doh10.7501/j.issn.0253—2670.2013.17.020 CloningandsequenceanalysisofphytoenedesaturasegeneinPogostmencablin OUYANGPu—yue,SHENXiao.fei。 ,ZENGShao—hua,WANGYing,MOXiao.1u 1.GuangdongFoodandDrugVocationalCollege,Guangzhou510520,China 2.WuhanBotanicalGarden,ChineseAcademyofSciences,Wuhan430074,China 3.SouthChinaBotanicalGarden,ChineseAcademyofSciences,Guangzhou510650,China Abstract:ObjectiveInordertoelucidatethecarotenoidmetabolicpathwayinPogostemoncablin,aphytoenedesaturase(PDS)ofP. cablin(PcPDS1)genewasclonedandanalyzedbioinformatically.MethodsThefulllengthPDSgenesequencewasretrievedfrom transcriptomicdatabaseofP.cablin,thefulllengthprimerwasdesignedforPCRverification,andPcPDS1genewasanalyzedusing severalbioinformatica1softwares.ResultsPcPDS1fNCBIaccession.KC854409)contained1960bplengthofopenreadingflame (ORF)andencoded569aminoacidspostulated.Additionally,thephysicalandchemicalpropertiesofPcPDS1.codedproteinwere analyzedbybioinformaticalsoftwares.PhylogeneticanalysisshowedthatPcPDS1wastightlyclusteredwithPDSgenesinGentiana lutea,Nicotianatabacum,andIpomoeabatatas,whichisconsistenttothephylogeneticrelationshipofspecies .ConclusionPcPDS1 issuccessfullycolonedandmolecularlycharacterized. Keywords:Pogostemoncablin(Blanco)Benth;phytoenedesaturase;PcPDS1gene;genecloning;bioinformaticalanalysis 广藿香Pogostemoncablin