ABI7500型荧光定量PCR仪标准操作及维护保养规程.pdf

ABI7500型荧光定量PCR仪标准操作及维护保养规程
文件名称：ABI7500型荧光定量PCR仪标准操作文件编号：
及维护保养规程
制定人：制定日期：页码：
修订人：修订日期：印数：1
审核人：审核日期：颁发部门：
批准人：批准日期：生效日期：
分发至：质量部
修订情况：

目的建立ABI7500型荧光定量PCR仪的标准操作及维护保养规程，为本
设备的操作提供标准依据。
适用范围ABI7500型荧荧光定量PCR仪的操作、维护保养、清洁过程。
责任与要求质量部人员必须遵照本规程。
培训对象质量部
内容
1.设备信息
仪器型号生产厂家软件版本

ABI7500RealTime
美国ABI公司7500Softwarev2.3
PCRSystem
2.操作流程示意图

开机自检样品上机编辑运行参数运行实验

填写使用记录退出结果分析
3.具体操作流程
3.1开机自检
3.1.1按下配套电脑的开机键打开电脑。

3.1.2按下ABI7500开关，打开仪器，仪器自动进行自检。待仅有“power”指示
灯（绿色）亮时，自检结束。
3.2样品上机
3.2.1按下托盘按钮，弹出96孔管架托盘，确定所需的96孔管架。
3.2.2将加好样品的八连管或96孔板放入相应的孔位。

文件名称：荧光定量PCR仪标准操作及维护保文件编号：
养规程页码：

3.2.3将托盘推入原来位置。
3.3编辑运行参数

3.3.1双击桌面上7500Softwarev2.3软件图标，打开7500Softwarev2.3软件。
3.3.2在弹出的窗口点击“NewExperiment”新建实验程序，并对实验参数进行设
置：
3.3.2.1在ExperimentName（实验名称）字段中，可以自定义实验名称。
3.3.2.2在Barcode（条形码）字段中，输入反应板条码。
3.3.2.3在UserName（使用者姓名）字段中，输入您的姓名。
3.3.2.4在Comments（备注）字段中，输入您想保存到文件中的任何附加信息。
3.3.2.5默认选择instrument（仪器）-----7500(96wells)。
3.3.2.6默认选择Experimenttype（实验类型）-----Quantitation-StandardCurve。
3.3.2.7默认选择Reagents（试剂）-----TaqMan®Reagents（TaqMan®试剂）。
3.3.2.8默认选择Rampspeed（升降温速度）-----Standard（～2hourstocompletea
run）。
3.3.3点击“PlateSetup”进入到反应孔板设置选项。
3.3.3.1点击“DefineTargetsandSamples”设置要添加的探针、样本信息

3.3.3.2默认已有“Target1”，对应“Reporter”是FAM，单击“”下拉箭头可更换不

同探针；对应“Quencher”为NFQ-MGB，单击“”下拉箭头可更换不同淬灭基团；

对应“Coulour”，单击“”下拉箭头可更换不同标识颜色。
3.3.3.3单击“AddNewTarget”，可以增加探针，并进行相应设置；单击“Delete
Target”，可以删除已添加到反应板文件的探针。

3.3.3.4默认已有“Sample1”，可根据需要更改样本名称，对应“Coulour”，单击“”
下拉箭头可更换不同标识颜色
3.3.3.5单击“AddNewSample”，可以增加样本名称，并进行相应设置；单击
“DeleteSample”，可以删除已添加到反应板文件的样本名称。
3.3.3.6点击“AssignTargetsandSamples”进入到反应孔板设定。
3.3.3.7单击一个反应孔，或按住Ctrl同时选取多个反应孔。
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3.3.3.8单击探针名前面的空白方块，以此为反应孔勾选需要的探针，所选反应
孔中显示探针任务和颜色。
3.3.3.9单击样本名前面的空白方块，以此为反应孔勾选需要的样本名称，所选
反应孔中显示样本名称
3.3.3.10选择合适的参比荧光(PassiveReference)，若没有，选择（None）
3.3.4PCR反应参数设定
3.3.4.1点击“RunMethod”进入到PCR反应参数设定选项。
3.3.4.2在操作界面按照需要的条件对热循环条件进行设置，主要包括：循环数、
温度、时间、采集荧光信号位置、反应体积等。
3.3.4.3选择“SaveRunMethod”，为本次数据文件输入一个文件名，然后单击
Save（保存）。
3.4运行实验

单击“Starttheinstrumentrun”（启动仪器运行）