2023年药材显微鉴别法操作规程.docx

药材显微鉴别法操作规程
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编号：1302·034-01
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变更记载：
制定〔变更〕缘由及目的：
修订号
批准日期
生效日期
执行2023年版《中国药典》。
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生产 部
[ ]份质量 部
[ ]份企业治理部
[ ]份
分发部门
供应 部
[ ]份财务 部
[ ]份总工 办
[ ]份
营销 部
[ ]份产品开发部
[ ]份办公 室
[ ]份

适用范围：适用于药材显微鉴别。
职责
检验员：严格按操作规程进展检验。QC主任：监视检查执行状况。
定义
显微鉴别系指用显微镜对药材〔饮片〕切片、粉末、解离组织或外表制片及含药材粉末的制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进展鉴别的一种方法。鉴别时选择有代表性的供试品，依据各品种鉴别项的规定制片。制剂依据不同剂型适当处理后制片。此法适用于：
·药材性状鉴别特征不明显或外形相像而组织构造不同；
·药材呈粉末状或已裂开，不易识别或区分；
·凡含药材粉末的制剂；
·用显微化学方法确定药材中有效成分在组织中的分布状况及其特征。
在进展显微鉴别时，首先要将样品制成适用于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片；对于粉末药材〔包括丸、散等成方制剂〕可直接装片或作适当处理后装片。
药材切片标本的制作方法较多。在药材鉴定的争论工作中往往将其制成石蜡切片〔永久切片〕，因制在石蜡切片外形较完整，厚薄均匀，且可制得连续切片，既便于观看，又能长期保存。但由于制片技术简洁，费时太多，不适用于日常检验。所以在中药鉴定工作中常常采
用徒手切片或滑走切片法制片；为观看叶类、花类及全草类药材的叶片、花冠、萼片、苞片等的表皮组织及其附属物的特征，还需要将其制成外表装片；为清楚地观看比较硬的细胞组织，如导管、纤维、石细胞等的形态，往往还要进展“组织解离”后装片；观看花粉、孢子等的形态特征或构造，需用花粉粒与孢子制片法制片；观看矿物药或较坚硬的动物类药材如珍宝、石决明及动物骨骼，可承受磨片法制片。这些镜检标本片一般都是在观看前临时制备，故统称为“临时制片技术”。
本规程以中国药典现行版和局颁、部颁标准收载品种的显微鉴别工程要求为主，故主要
介绍与临时制片技术有关的仪器、用具、试液和操作方法等。
仪器与用具
仪器生物光学显微镜〔应配有目镜测微尺和载物台测微尺，最好具2.5×或4×物镜头和偏光装置〕、显微摄影装置或显微描绘器、电脑联机装置及其图像处理软件、滑走切片机、小型粉碎机、台式离心机、医用超声仪等。
用具
放大镜、刀片、解剖刀、镊子〔包括粗镊及眼科弯镊与直镊〕、剪〔眼科剪与手术剪〕、解剖针等。
载玻片、盖玻片。
吸湿器〔即玻璃枯燥器改装成底部放入蒸馏水并加微量苯酚防霉，上部瓷板上置药材样品，利用潮气润湿药材样品〕、培育皿或小烧杯〔放切片用，切片后的处理无可在其中进展〕、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管，试管架、滴管、玻璃棒〔粗与细、〕乳钵、量筒等。
毛笔〔从刀上刷取切片用〕、铅笔〔HB、3H或6H铅笔绘图用〕、带盖搪瓷盘〔〕、纱布、绸布、滤纸、火柴等。
试液
水合氯醛试液 此液为常用封藏液，也是透化剂。可使干缩的细胞膨胀而透亮，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质、叶绿素及挥发油等，加热后透化效果更为明显。
甘油醋酸试液〔斯氏液〕此液为常用封藏液。专用于观看淀粉粒形态，可使淀粉粒保持原形，便于测量其大小。
甘油乙醇试液此液为常用封藏液，也是软化剂。常用于保存植物性材料及临时切片，有软化组织的作用。
苏丹III试液 此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。
钌红试液此液可使黏液染成红色。本液应临用制。
间苯三酚试液此液与盐酸合用，可使木化细胞壁染成红色或紫红色。
典试液此液可使淀粉粒染成蓝色或紫色；蛋白质或糊粉粒染成棕色或黄棕色。
硝铬酸试液此液为常用的“植物组织解离液”。解离浸泡时间，按样品的质地不同而异。
a-萘酚试液此液可使菊糖染成紫红色，并很快溶解。
硝酸汞试液〔米隆氏试液〕此液可使糊粉粒染成砖红色。
氯化锌碘试液 此液用于检查木质化与纤维素细胞壁，前者显黄棕色，后者显蓝色或紫色。
以上水合氯醛等试液，均应符合〔中国药典2023年版一部附录XVB规定〕规定。
制片
横切片或纵切片
选取供试品欲观看部位，经软化处理后，用徒手或滑走切片法，切成10~20μm的薄片，必要时可包埋后切片。选取平坦的薄片置载玻片上，依据观看对象的不同，滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他试液1～2滴，盖上盖玻片。必要时滴加水合氯醛试液后，在洒精灯上加热透化，并滴加甘油乙醇试液或稀甘油，盖上盖玻片。
粉末制片：主要用于粉末状的药材观看
取药材枯燥，用粉碎机粉碎后过四号筛，挑取粉末少许置载玻片上，滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试