从红葡萄果皮中提取白藜芦醇.doc

红葡萄皮渣中白藜芦醇的提取分离工艺研究

蓝昭军（13560457080）1陈康（13570281575）2陈晓华（13430292314）1
1华南师范大学生命科学学院生物工程一班
2华南师范大学生命科学学院生物科学三班

摘要
白藜芦醇是一种存在于多种植物的酚类物质，能够阻止低密度脂蛋白的氧化，因而具有潜在的防心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫调节作用。作者分别用95％的乙醇浸取法和超声波破碎法提取葡萄皮渣中的白藜芦醇，利用乙酸乙酯萃取得到粗制的白藜芦醇，比较了乙醇浸取法和超声波破碎法的优劣。用葡聚糖凝胶层析法分离粗制的白藜芦醇，得到精制的白藜芦醇。
关键词：葡萄皮渣白藜芦醇提取分离凝胶层析
1前言
白黎芦醇（Resveratrol，Res），化学名称为芪三酚，分子式C14H12O3，分子量228.25，产生于葡萄叶表皮和浆果果皮中，是植株对真菌病害感染反应的结果。它以游离态(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)两种形式存在，且均具有抗氧化效能，是葡萄中的一种重要的植物抗毒素。白藜芦醇是一种极有前途的化学物质,它对肿瘤具有化学预防作用,而且对癌细胞具有选择性杀伤力。白藜芦醇对治疗心脑血管疾病有很好的疗效,且毒性很小,便于长期服药。白藜芦醇的抗氧化作用很引人注目,因为它涉及到与人体健康密切相关的许多生理疾病,如动脉粥样硬化、炎症与过敏反应、老年痴呆症、病毒性肝炎等,这些病不仅关系到人们的健康,还进一步关系到人们的生活质量。白藜芦醇甙近年来的研究状况表明,它具有增强心肌收缩性,调节血管张力,改善微循环,保护肝细胞,降血脂及抗氧化等作用。
白黎芦醇是葡萄植株或果实处在不良环境时而产生的植物抗毒素，它在很多食物中存在，如葡萄、桑葚和花生等。葡萄酒中都存在白藜芦醇，但红葡萄酒中含量较高。研究表明，白藜芦醇可通过保护细胞线粒体中的DNA（脱氧核糖核酸）免遭化学损害而发挥延缓衰老功效。
对葡萄果肉、叶柄、种子、叶片、果皮及穗轴的检测发现,各组织中白藜芦醇含量差异较大,穗轴和果皮中的含量较高[1]。酿造业和饮料业产生大量的葡萄皮渣废料，其中大部分直接作为饲料，而提取白黎芦醇纯品或含白葵芦醇的营养保健食品则又是一条高附加值的综合利用途径。
有关白藜芦醇的分离与提纯的研究已经有了相关报道，但利用葡聚糖凝胶层析法精制的方法尚未见有报道，作者以葡聚糖凝胶层析法提取白藜芦醇，为其分离与提纯的研究提供基础资料。
[1]王劲松.葡萄与葡萄酒中白藜芦醇的含量及其影响因素[J].宁夏农林科技,2003,(06)

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B
[1]祖丽皮亚·玉努斯.从酿造葡萄酒皮渣中提取白藜芦醇及白藜芦醇在体外抑菌、抑瘤作用的研究[D].新疆农业大学,2001

ck(2007-03-2300:00:55)
A
[1]白杨,潘隽丽,苏薇薇.白藜芦醇与白藜芦醇甙的研究进展[J].中药材,2004,(01)

2实验目的
从葡萄皮渣中粗提白藜芦醇，并用葡聚糖凝胶层析法精制白藜芦醇，研究和探讨白藜芦醇精制的方法，为进一步改进其工艺提供基础资料。
3实验原理
白黎芦醇是植物体内天然的二苯乙烯类多酚物质，具有较强的极性，可溶于极性的有机溶剂。利用乙醇的长时间浸泡或者在超声波条件下利用乙醇短时间浸泡，均可以提取到含有白藜芦醇的溶液，再用乙酸乙酯进行萃取，即可得到粗制的白藜芦醇。粗制的白藜芦醇，经过葡聚糖凝胶层析，可得到纯度较高的白藜芦醇。
4实验设备
4.1仪器
超声波细胞粉碎机、HWS24型电热恒温水浴锅、旋转蒸发器、冷冻干燥机、电炉、石棉网、布氏漏斗、分析天平
4.2玻璃器具
40目筛*1、碱式滴定管*1、瓷坩埚*3、坩埚钳*1、玻棒*3、称量瓶*3、500ml烧杯*3、1000ml烧杯*3、250ml烧杯*9、不锈钢煲*1、黑色胶手套*3对、药匙*1、大漏斗*3、分液漏斗*3、试管夹*6，试管架*1、试管*12、吸管*1、小剪刀*1、蒸馏水瓶*3、锥形瓶*9、1000ml/500ml/100ml容量瓶*1、1L/250ml/50ml量筒*1、1000ml试剂瓶*5、500ml试剂瓶*3、100ml试剂瓶*3、表面皿*5、小滤纸若干、精确PH试纸一沓
5实验材料与试剂
5.1材料
红葡萄皮渣（由葡萄榨汁后收集得）
5.2试剂
乙醇（95％）、三氯甲烷、乙酸乙酯、葡聚糖、丙酮（分析纯）、超纯水、FeCl3、NaOH、HCL溶液
5.3试剂的配制
1.5mol/LNaOH100ml6gNaOH蒸馏水定容到1000ml
1mol/LHCl100ml10ml浓HCl(37%)蒸馏水定容到100ml
0.5mol/LFeCl350ml4.14gFeCl3定容到50ml
6实验步骤：
6.1浸取法粗提白藜芦醇
6.1.1粗提流程图
淘汰的葡萄皮渣+9