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响应面优化设计提取葡萄籽中的白藜芦醇
引言：
白藜芦醇是一种天然存在于植物中的多酚类物质，其具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种生物效应。近年来，白藜芦醇的医学研究逐渐得到人们的重视，白藜芦醇与心脑血管疾病、肝炎、糖尿病、癌症等的关系备受关注。而半导体激光光解技术是目前应用较广的一种提取方法，但是提取效果受到多种因素的影响。因此，本文采取响应面优化设计提取葡萄籽中的白藜芦醇的方法，以期得到最优提取条件。
材料与方法：
材料：葡萄籽
仪器设备：半导体激光光解系统、高效液相色谱仪、离心机、水浴器、紫外分光光度计
提取方法：
先将葡萄籽粉末样品称取约2克，并放入离心管中，加入50mL甲醇，液体河粉两级浸泡两小时，震摇超声加热30min取出，离心10000r/min10min，滤清，收集上清100μL装入色谱管；
条件需要：
半导体激光波长为355nm，聚焦镜头输出功率为200mW，照射时间为20s，波道数为1、补偿空白波长为泵浦波长（532nm）、分析跟踪显示HPLC波峰面积或高度。
HPLC仪器装置:采用SHISEIDO剑客C18柱(4.6mm*250mm,5μm)，检测波长为325nm，移动相A为乙酸乙酯-乙醇-水(9.5:10:80.5)，移动相B为甲醛-乙酸甲酯(1:9)，流速1.0ml/min，进样量10μL。柱温为25℃
试验设计：
响应面法采用Box-Behnken设计，建立三因素三水平的试验设计，提取时间（A）、提取温度（B）和甲醇浓度（C）是我们研究的三个重要因素，每个因素分别设三个水平，具体设计参数见表1。
设计方案：
本研究采用Box-Behnken设计。根据缺省值指定了一个三因素三水平的实验设计。表2是对应于本实验设计的实验试点，共设置了15个试验。整个试验过程在实验室温度下进行，每一个实验均对白藜芦醇的提取效果进行测试。
结果与讨论：
经过一系列数据处理，生成三维响应面图表。图1展示了在不同条件下白藜芦醇提取率的变化趋势，每个因素的水平变化对白藜芦醇提取量的影响同时也展示出来。
在响应面分析中，以白藜芦醇的提取率作为响应值，以提取时间、提取温度、甲醇浓度作为自变量，建立多元二次回归方程分析，并用Design-Expert8.0.1统计回归分析。
白藜芦醇的提取率（%）=+12.26+0.999A+1.125B+1.013C+0.236AB+0.230AC-0.015BC-0.459A^2-0.443B^2-0.404C^2
通过求解上述多元方程，达到对最优提取条件进行预测的目的。结果表明，当提取时间为104.17min、提取温度为28.93℃，甲醇浓度为53.85%时，白藜芦醇提取率最高为11.18%。
结论：
本研究采用响应面优化设计提取葡萄籽中的白藜芦醇的方法，采用Box-Behnken设计方案，结果表明，当提取时间为104.17min、提取温度为28.93℃，甲醇浓度为53.85%时，白藜芦醇提取率最高为11.18%。因此，本研究可以为葡萄籽中白藜芦醇的提取提供一种比较优良的方法，并且能够优化所选的提取参数。