从苦瓜中提取盐酸小檗碱.docx

分光光度法测定苦瓜籽中盐酸小檗碱的含量
摘要:采用超声波法,对苦瓜籽粉中盐酸小檗碱进行提取,利用分光光度法测定盐酸小檗碱的含量,检测波长为428nm。回归方程y=0.01737x＋0.00041，Ｒ＝0.9992，结果表明，盐酸小擘碱在0～6.9μｇ.mL-1范围内与吸光度呈线性关系。这方法的平均含量为1.7061μｇ.mL-1。平均回收率分别为99.09%。实验结果表明,用超声波提取盐酸小檗碱提取率较高，实验提取方法可靠。分光光度法用于苦瓜籽粉中盐酸小檗碱的含量测定,简便,可靠,快捷。
1实验药品及仪器
1.1验药品
盐酸小檗碱四川世坤植化有限公司
苦瓜籽（市售）焦作市山阳商城
蒸馏水（化学纯CP）深圳华南高科双蒸馏水器制取
无水乙醇(分析纯AR)天津威晨化学试剂科贸有限公司
浓盐酸分析纯AR)天津市大陆化学试剂厂
白凡士林（二级）商丘市睢阳区伟康医用品厂
1.2实验仪器
DHG-9245A型电热鼓风干燥器上海一恒科学仪器有限公司
MC电子分析天平北京赛多利斯仪器系统有限公司VCS61/62型打碎机HYPERLINK"http://shop.cnsb.cn/index-416366.html"\t"_blank"北京丰汇加机电设备销售有限公司
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KQ-300VDB型三频数控超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司
TU－1901型紫外-可见光分光光度计上海元析仪器有限公司
锥形瓶(250mL)；容量瓶(500mL，250ml、100mL、50mL、10m)；吸量管（2mL、5mL）；离心管；比色管（25mL）；比色皿；坩埚；布氏漏斗；砂芯漏斗及滤纸
2.总盐酸小檗碱的含量测定及提取
2.1盐酸小檗碱标准溶液的配制
将盐酸小檗碱于80℃烘箱中烘至恒重，置干燥器中冷却后，精密称取无水盐酸小檗碱对照品0.5900mg，置50ml的容量瓶中，加盐酸:乙醇(1:100)至刻度，摇匀，即得盐酸小檗碱标准溶液。
2.2盐酸小檗碱的提取
2．2.1原料的预处理
选取磨好的苦瓜籽粉在电热鼓风干燥箱箱80℃的条件下烘干，烘干之后，称其重量。计算失水率0.4344%，然后放入干燥器中待称样。
2．2.2从苦瓜籽中提取盐酸小檗碱
称量苦瓜籽粉0.2007g，置于25mL的锥形瓶中,加入盐酸∶乙醇(1∶100体积比)约3.00mL,60℃水浴加热15min,然后置于超声波清洗器中水浴50℃超声60min冷却至室温。用布氏漏斗抽滤，将滤液4000转离心30min，然后用0.45μm微孔滤膜过滤，之后用盐酸:乙醇(1:100)定容至50ml容量瓶,摇匀作为供试品液待测。
2.2.3最大吸收波长的选取
准确吸取一定量的盐酸小檗碱标准液于50mL容量瓶中，加入盐酸:乙醇(1:100)溶液刻度，配制1.6ug/ml盐酸小檗碱作为显色标准溶液。用盐酸:乙醇(1:100)溶液作参比液。准确取1.00ml的供试品液配制10ml的容量瓶中作为样品溶液。用紫外分光光度计分别300~500nm波长范围内扫描显色和未显色的标准溶液和样品溶液，选择出最大吸收波长428nm。见下图

2.2.4标准曲线的绘制
精密量取对照品溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL分别置于25mL的容量瓶中，各加入加入盐酸——乙醇（1:100）溶液定容至刻度，摇匀，在428nm波长处测定吸光度，以浓度ｃ为横坐标，吸光度ａ为纵坐标做线性回归，得回归方程为y=0.01737x＋0.00041，Ｒ＝0.9992，结果表明，盐酸小擘碱在０～6.9μｇ.mL-1范围内，吸光度与浓度呈良好的线性关系。见图２
标准曲线

2.3超声波法提取盐酸小擘碱的最佳条件的研究
2.3.1料液比对盐酸小擘碱提取率的影响
精密称取6份粉碎后的样品各约0.1g，分别置于离心管中，编号1.2.3.4.5，按编号分别加入0.1ｍL（1:5），1.0ｍL（1:10），1.5ｍL（1:15），2.0ｍL（1:20），3.0ｍL（1:30），４.0ｍL（1:40）盐酸——乙醇（１:100）溶液，在置于55℃溶液中超声波提取一次，抽滤，将滤液离心30min（4000转／min），用0.45滤膜过滤，再用盐酸——乙醇（1:100）溶液定容至10ｍL容量瓶，摇匀待测，见下表。
料液比
料液比1:51:101:151:201:301:40吸光度/Abs0.12670.23530.23530.31600.30970.2513所得图形见下图：

2.3.2提取时间对盐酸小擘碱提取率的影响
精密称取５份粉碎后的样品各约0.10g，分别置于离心管中，编号1.2.3.4.5，按编号依次加