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·130·ChineseJReparativeandReconstructiveSurgery,2002,Vol15(2) ·组织工程· 壳聚糖2明胶网络ö羟基磷灰石复合材料支架的研究 ——成骨细胞培养 赵峰1尹玉姬1姚康德1郭刚2王宝利2张镜宇2章明放3 【摘要】目的研究大鼠颅骨成骨细胞在壳聚糖2明胶网络ö羟基磷灰石(CS2GelöHA)复合材料支架上 的生长情况。方法将原代培养大鼠颅骨成骨细胞第3代,密度为1.01×106öml悬液,种植于孔隙率分别为 85.20%、90.40%和95.80%的CS2GelöHA支架材料中,利用细胞计数法检测种植后3天,1、2及3周的细胞增殖 曲线,采用HE和vonKossa染色方法观察细胞生长、骨样组织形成和矿化沉积情况。结果大鼠颅骨成骨细胞在 孔隙率为85.20%的支架中增殖较慢,在孔隙率为90.40%和95.80%的CS2GelöHA复合材料支架上生长良好,增 殖较快,周围分泌有大量细胞外基质,3周时局部已出现骨样组织,且细胞ö支架结构物有利于钙质沉积。结论 CS2GelöHA复合材料支架有望成为培养自体成骨细胞的材料,以重建新的骨组织。 【关键词】组织工程壳聚糖2明胶网络ö羟基磷灰石成骨细胞细胞外基质 TISSUEENGINEERINGSTUDYONCHITOSAN-GELATINöHYDROXYAPATITECOMPOSITESCAFFOLDS ——OSTEOBLASTSCULTUREöZHAOFeng,YINYu2ji,YAOKang2de,etal.ResearchInstituteofPolymeric Materials,TianjinUniversity.Tianjin,P.R.China300072 【Abstract】ObjectiveToinvestigatethebehaviorofratcalvarialosteoblastsculturedonchitosan2 gelatinöhydroxyapatite(CS2GelöHA)compositescaffolds.MethodsTheratcalvarialosteoblasts(the3rd passage)wereseededatadensityof1.01×106cellsömlontotheCS2GelöHAcompositescaffoldshavingporosity 85120%,90140%and95180%.Cellnumberwascountedafterculturedfor3days,1week,2weeksand3weeks. Cellproliferation,bone2liketissueformation,andmineralizationwereseparatelydetectedbyHE,vonKossa histologicalstainingtechniques.ResultsTheCS2GelöHAcompositescaffoldssupportedtheattachmentofseeded ratcalvarialosteoblasts.Cellsproliferatedfasterinscaffoldwithhigherporosity90140%and95.80%than scaffoldwithlowerporosity85120%.Theosteoblastsöscaffoldconstructswerefeasibleformineraldeposition,and bone2liketissueformationin3weeks.ConclusionThisstudysuggeststhefeasibilityofusingCS2GelöHA compositescaffoldsforbonetissueengineering. 【Keywords】TissueengineeringChitosan2gelatinöhydroxyapatiteOsteoblastsExtracellular matrix Foundationitems:NationalBasicScienceResearchandDevelopmentGrants(G1999054305);NationalNatural ScienceFoundationofChina(59883002) 骨具有再生和自行修复能力,因肿瘤切除、外病和免疫排斥反应等问题。近年来开发的组织工程 伤、骨疾病及骨异常生长所造成的骨缺损,在单纯依学研究方法[1~3]。其基本方法是将体外培养的高浓 靠骨自行修复无法愈合的情况下,则需采用手术治度种子细胞种植于具有生物相容性和可降解性的天 疗。传统的