边做边学酵母菌细胞的固定化技术.pptx

1.固定化酶
(1)概念：固定化酶是指用或的方法将酶与结合在一起形成的仍具有酶活性的。
(2)特点：在催化反应中，它以状态作用于底物，反应完成后容易与水溶性和分离，可被使用。2.制备固定化酶的常用方法
(1)物理吸附法是将酶吸附在、等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式，其显著特点是工艺简便且条件温和。
(2)化学结合法是利用进行酶与载体之间的交联，在酶和多功能试剂之间形成，从而得到三维的。
(3)包埋法是将酶包埋在能固化的中，如将酶包裹在_______________
等高分子凝胶中包埋成，或包裹在等半透性高分子膜中包埋成。(1)图A为，它的显著特点是且条件，在生产实践中应用广泛。
(2)图B为，它是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，在酶和多功能试剂之间形成，从而得到三维的交联网架结构。(3)包埋法是将酶包埋在中。将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等中(如图C)，包埋成型；或包裹在等半透性高分子膜中(如图D)，包埋成型。(3)在医学上，利用可以生产小儿麻痹症疫苗、狂犬病疫苗、麻疹疫苗、肝炎疫苗、口蹄疫疫苗等，还可以生产生长激素、干扰素、胰岛素、催乳素、促性腺激素等。
(4)将固定化的制成微囊，能治疗糖尿病。
(5)用固定化细胞制成的生物传感器可用于医疗诊断。
(6)在化学分析方面，可制成各种传感器，用来测定醋酸、乙醇和氨等。
(7)固定化细胞在、能源开发等领域都有着重要的应用。3.固定化细胞技术的优点
(1)固定化细胞技术无须进行酶的，减少了酶的损失，同时大大降低了生产成本。
(2)固定化细胞不仅可以作为发挥作用，而且可以利用细胞中所含的完成一系列的催化反应。
(3)对于活细胞来说，保持了酶的原始状态，酶的更高。
(4)细胞生长停滞时间，反应。
正是由于固定化细胞的这些无可比拟的优势，尽管固定化细胞技术的出现远远晚于固定化酶技术，但它的应用范围比固定化酶更广泛。4.固定化细胞技术的缺点
(1)固定化细胞只能用于生产酶和其他能够分泌到细胞外的产物。
(2)由于载体的影响，营养物质和产物的受到一定限制。
(3)在好氧性发酵中，的传递和输送成为关键的限制因素。
5.细胞的固定化方法
是应用最广泛的细胞固定化方法，适用于各种微生物、____
和细胞的固定化。凝胶包埋法所使用的载体主要有、琼脂、角叉菜胶、明胶等。用海藻酸钠凝胶包埋法制备固定化细胞的操作，条件，对细胞。6.酵母菌细胞的固定化技术的过程
准备各种实验药品和器材―→制备―→酵母菌细胞―→配制物质的量浓度为0.05mol/L的氯化钙溶液―→制备―→浸泡和洗涤―→麦芽汁。配制物质的量浓度为
0.05mol/L的氯化钙溶液1.在酵母菌细胞的活化和配制CaCl2溶液时，都使用了蒸馏水，为什么不能使用自来水？
答案防止自来水中各种离子影响实验结果。
2.配制海藻酸钠溶液时加热是关键，为什么要用小火间断加热？
答案防止海藻酸钠溶液焦糊。
3.能否在刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母菌细胞？
答案不能，因为刚溶化好的海藻酸钠溶液温度较高，会将酵母菌细胞杀死。(1)固定化细胞与固定化酶的主要区别
①固定化细胞使用的是活细胞，因而为了保证其生长、增殖的需要，应该为其提供一定的营养物质。
②固定化细胞由于保证了细胞的完整性，酶的环境改变小，所以对酶的活性影响最小。
(2)凝胶珠的检测：刚形成的凝胶珠应在氯化钙溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格可以使用下列方法：一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，且没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功；二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。课堂小结