一种高选择性灵敏检测镍离子荧光探针、制备方法与应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115650900A(43)申请公布日2023.01.31(21)申请号202211378703.9G01N21/64(2006.01)(22)申请日2022.11.04A61K49/00(2006.01)(71)申请人山东省科学院生物研究所地址250000山东省济南市历下区科院路19号(72)发明人李泽佶史沫苒于谦李筱张晓琪盛文龙李灿于妙慧李文斋付婷婷蔡雷齐君张云(74)专利代理机构北京佰智蔚然知识产权代理有限公司37285专利代理师赵允洲(51)Int.Cl.C07D209/60(2006.01)C09K11/06(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图4页(54)发明名称一种高选择性灵敏检测镍离子荧光探针、制备方法与应用(57)摘要本发明涉及一种高选择性的镍离子荧光探针，以此提供一种有效简便的检测镍离子的方法。具体地，本发明的探针为一种喹啉盐衍生物类化合物，其可作为镍离子荧光探针用于对镍离子的检测。这类探针可实现如下的技术效果中的至少一个：高选择性地识别镍离子；可以实现对镍离子的灵敏性检测；能够准确的对镍离子进行定量分析；性质稳定；能够长期保存使用；还可用于活细胞以及斑马鱼中镍离子的检测。CN115650900ACN115650900A权利要求书1/1页1.一种用于测量、检测或筛选镍离子的荧光探针，其特征在于：化学结构式如式(Ⅰ)所示：其中：R1，R2，R3，R4，R5和R6为独立地选自由氢原子、直链或支链烷基、直链或支链烷氧基、磺酸基、酯基和羧基组成的组；且其中的R1，R2，R3，R4，R5和R6可以相同或不同。2.如权利要求1所述的荧光探针，其特征在于：R1，R2，R3，R4R5和R6均为氢原子。3.一种制备权利要求1或2所述荧光探针的方法，其特征在于，包括如下步骤：以式喹啉盐(III)和化合物(IV)和为原料，按照如下反应路线进行反应制备：其中：R1，R2，R3，R4，R5和R6为独立地选自由氢原子、直链或支链烷基、直链或支链烷氧基、磺酸基、酯基和羧基组成的组；且其中的R1，R2，R3，R4，R5和R6可以相同或不同。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将式(Ⅲ)和式(IV)化合物溶于乙腈溶液中，再加入一定摩尔比的哌嗪，氮气保护下加热回流反应，反应结束后，真空抽滤得到滤液并在减压条件下旋蒸干溶剂，得到粗产品，将粗产品用二氯甲烷进行柱色谱分离，得到纯净的式(Ⅰ)化合物。5.一种用于测量、检测或筛选镍离子的荧光探针组合物，其包含权利要求1‑2中任一项所述荧光探针。6.如权利要求5所述荧光探针组合物，其特征在于，所述荧光探针组合物进一步包含溶剂、酸、碱、缓冲溶液或其组合。7.一种用于检测样品中镍离子的存在或测定样品中的镍离子含量的方法，其包括：a)使权利要求1‑2中任一项的荧光探针与样品接触以形成荧光化合物；b)测定所述荧光化合物的荧光性质。8.如权利要求7所述方法，所述样品是水样品、化学样品或生物样品。9.根据权利要求1或2所述荧光探针的应用，其特征在于：所述荧光探针制备应用于检测或实时检测生物体内镍离子的试剂。10.权利要求1‑2任一项所述荧光探针在细胞荧光成像的应用。2CN115650900A说明书1/6页一种高选择性灵敏检测镍离子荧光探针、制备方法与应用技术领域[0001]本发明涉及苯并吲哚衍生的化合物作为镍离子荧光探针，能够对镍离子快速响应特异性识别，或者其可测定样品中镍离子在的浓度，并同时可用于活细胞或者斑马鱼内镍离子的检测；本发明还提供了制备所述荧光探针的方法。背景技术[0002]镍作为人体必须的微量元素，主要源自蔬菜、谷类食物，以及海带等。但随着大家对生活品质要求的不断提高，各种净化饮水机广受欢迎，但是有些饮水机反复加热水后镍离子含量会增加，金属类餐具反复使用也会导致人体摄入过量的镍。正常情况下，人体血液中镍含量约为0.11ug/ml，当镍含量高于正常标准时，会严重危害人类健康。镍对人体最大的危害就是皮肤，直接影响皮肤的颜色，引发接触性皮炎。皮肤接触镍后，以剧痒为首发症状，随后出现丘疹、疱疹，以及红斑，病情严重者甚至出现溃烂、化脓等炎症反应。[0003]有报道称，长期接触镍，容易出现头发变白、沙眼、慢性咽炎等，并且低浓度镍及其化合物与盐酸、氨等的联合毒性作用更大，通过皮肤黏膜、呼吸道，引起皮炎、气管炎，以及肺炎。镍具有致癌性，1990年，镍化合物被世界卫生组织下属的国际癌症研究机构列为一类致癌物。镍对肺和呼吸道有刺激和损害作用，流行性病学调查发现镍化合物可引起镍冶炼工人的鼻癌和肺癌，并且香烟中有含量较高的镍能与烟雾中的一氧化碳结合成四羰基合镍,导致吸烟者更易患肺癌。白血病人血清中镍含量是健康人的2‑5倍，且患病程