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重组DNA分子的模拟操作 目的要求:大家通过亲自动手操作,初步探索三种基本工具的具体应用和基因工程的主要步骤,进一步理解基因工程的基本原理。 材料用具: 大家自备 1.剪刀(代表限制酶) 2.胶布(代表DNA连接酶) ……TCCTAGGAATTCTCCTAGGCAGAATTCTAG…… ……AGGATCCTTAAGAGGATCCGTCTTAAGATC……3.两种颜色的分别画有如下DNA序列的A4纸(老师分发给每组)。 (白色:目的基因DNA分子) ……ATAGGATCCTATCCATGAATTCGGCATACG…… ……TATCCTAGGATAGGTACTTAAGCCGTATGC……(绿色:载体DNA分子) 操作步骤: 1、用剪刀(代表相应的限制酶)进行DNA“切割”。先分别从两张纸的一条DNA找出限制酶的识别的特定核苷酸序列,并在特定的切点处切割DNA分子,再在另一张纸上也找相同的识别序列,并也在相同的切点处切割DNA分子,且目的基因有两段识别位点。 2.切割后,将白纸上的DNA重组到绿色切口处,用不干胶(代表DNA连接酶)将切口连起来,这样就完成重组DNA分子模拟制作。 备注: 1.以小组为单位,每小组完成一个重组DNA分子的模拟制作。 2.各小组用的限制酶不同,规定如下: 第1、2、3组所用的“剪刀”为限制酶Ⅰ,其识别序列及切点为—G↓AATTC— 第4、5、6组所用的“剪刀”为限制酶Ⅱ,其识别序列及切点为—G↓GATCC-- 第7、8、9组所用的“剪刀”为限制酶Ⅲ,其识别序列及切点为—↓GATC—