重组DNA的基本步骤专家讲座.pptx
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重组DNA的基本步骤专家讲座.pptx
重组DNA基本步骤重组DNA基本步骤取得目标基因路径这么就能够用限制性内切酶把一个基因组DNA分成很多片段,对于原核生物比较小基因组来说,能够直接用标识地探针来获取在经过特定方法,对于比较大基因组,能够先制作基因文库,然后钓取所需要带有目标基因片段。限制性内切酶对DNA切割方式有两种,一个切割方式是完全酶切,另一个方式为部分酶切。体外重组连接惯用方法1黏性末端连接法2平齐末端连接发平齐末端连接法:用化学合成法、逆转录酶酶促合成法取得DNA片段或cDNA片段,以及一些限制酶酶切产生DNA片段,称为平齐末端。
重组DNA的基本步骤专家讲座.pptx
重组DNA基本步骤重组DNA基本步骤取得目标基因路径这么就能够用限制性内切酶把一个基因组DNA分成很多片段,对于原核生物比较小基因组来说,能够直接用标识地探针来获取在经过特定方法,对于比较大基因组,能够先制作基因文库,然后钓取所需要带有目标基因片段。限制性内切酶对DNA切割方式有两种,一个切割方式是完全酶切,另一个方式为部分酶切。体外重组连接惯用方法1黏性末端连接法2平齐末端连接发平齐末端连接法:用化学合成法、逆转录酶酶促合成法取得DNA片段或cDNA片段,以及一些限制酶酶切产生DNA片段,称为平齐末端。
重组DNA药物专题知识专家讲座.pptx
第七章重组DNA药品优点:1、可大量生产过去难以取得生理活性蛋白和多肽;去除内源性物质不足之处2、提供足够数量生理活性物质,以进行生理生化、结构研究3、利用基因工程技术可发觉、挖掘更多内源性生理活性物质4、取得新型化合物主要基因工程产品研制、开发、上市时间DNA重组药品制造主要步骤二、基本过程1、目标基因取得4、PCR法或逆转录PCR(RT-PCR)经典PCR反应包含①模板变性94℃以上(1~2′)②退火50~55℃(1~2′)③延伸72℃(1~2′)在高温聚合酶作用下,以DNA单链为模板,由引物起始从5
重组DNA药物医学知识专家讲座.pptx
第七章重组DNA药品优点:1、可大量生产过去难以取得生理活性蛋白和多肽;去除内源性物质不足之处2、提供足够数量生理活性物质,以进行生理生化、结构研究3、利用基因工程技术可发觉、挖掘更多内源性生理活性物质4、取得新型化合物主要基因工程产品研制、开发、上市时间DNA重组药品制造主要步骤二、基本过程1、目标基因取得4、PCR法或逆转录PCR(RT-PCR)经典PCR反应包含①模板变性94℃以上(1~2′)②退火50~55℃(1~2′)③延伸72℃(1~2′)在高温聚合酶作用下,以DNA单链为模板,由引物起始从5
重组DNA技术和基因工程专家讲座.pptx
重组DNA技术与基因工程酵母分类学特征酵母表示外源基因优势酵母受体系统提升重组蛋白表示产率突变型受体提升重组蛋白表示产率突变型受体抑制超糖基化作用突变型受体衰减泛素依赖型蛋白降解作用突变型受体降低泛素依赖型蛋白降解作用突变型受体降低泛素依赖型蛋白降解作用突变型受体酵母克隆表示质粒构建酵母中野生型质粒乳酸克鲁维酵母中线状质粒酵母克隆表示质粒构建含有CENYCp质粒构建YAC载体应含有以下元件:酵母人造染色体使用:含有酵母菌染色体DNA同源序列YIp质粒构建酵母转化程序酵母转化程序碱金属离子介导酵母菌完整细胞