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重组DNA基本步骤重组DNA基本步骤取得目标基因路径这么就能够用限制性内切酶把一个基因组DNA分成很多片段,对于原核生物比较小基因组来说,能够直接用标识地探针来获取在经过特定方法,对于比较大基因组,能够先制作基因文库,然后钓取所需要带有目标基因片段。限制性内切酶对DNA切割方式有两种,一个切割方式是完全酶切,另一个方式为部分酶切。体外重组连接惯用方法1黏性末端连接法2平齐末端连接发平齐末端连接法:用化学合成法、逆转录酶酶促合成法取得DNA片段或cDNA片段,以及一些限制酶酶切产生DNA片段,称为平齐末端。当然平齐末端可用T4DNA连接酶连接,所需底物浓度高,效率低。所以通常要将平齐末端改造成黏性末端后再行连接。改造方法是加人工接头或结尾这一过程分为两个步骤1重组DNA引入宿主细胞2重组体克隆筛选与判定谢谢观看