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第三章外界因素对细菌的影响第一节理化因素对细菌的影响一、温度对细菌的影响温度是影响细菌生长的最重要因素之一。 温度对细菌的影响具体表现在: 影响酶活性,温度变化影响酶促反应速率,最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性,温度高,流动性大,有利于物质的运输,温度低,流动性降低,不利于物质运输,因此,温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度,对生长有影响。从微生物整体来看: 生长的温度范围一般在-10℃~100℃ 极端下限为-30℃,极端上限为105~300℃ 但对于特定的某一种微生物: 只能在一定温度范围内生长,在这个范围内,每种微生物都有自己的生长温度三基点,即最低、最适、最高生长温度(一)高温对细菌的影响(2)细菌对热的耐受力还受环境条件的影响 与培养基的营养成分有关—培养基中蛋白质含量高时比较耐热. 与pH有关—pH适宜时不易死亡,pH不适宜时,容易死亡. 与水分有关—含水量大时容易死亡,含水量小时不容易死亡. 与含菌量有关—含菌量高,抗热性增强,含菌量低,抗热性差。 与热处理时间有关—热处理时间长,微生物易死亡。2.应用:灭菌和消毒★干热灭菌法(dryheatsterilization) 焚烧法(incineration):是将被灭菌物品在火焰中燃烧,使所有的生物质碳化。简单、彻底,但对被灭菌物品的破坏极大。适用于无经济价值的物品灭菌,及耐灼烧的实验器具,如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。 干燥热空气灭菌法(hot-airoven):将物品放入烘箱内,然后升温至160℃—170℃,维持1—2小时。 适用范围:玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌,不适合液体样品,及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。 特点:由于空气传热穿透力差,菌体在脱水状态下不易杀死,所以温度高、时间长。 单门烤箱双门烤箱高压蒸汽灭菌法 是湿热灭菌中最好的方法, 通常1.05kg/cm2,的压力下面 (此时温度121ºC)处理15 -30min。要排冷空气,否则 会形成假压力,虽然压力达 到要求,温度却达不到相应 温度,而影响灭菌效果。 高压蒸汽灭菌法 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升,以达到100℃以上高温灭菌的方法。 方法:121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)维持15-20min。 115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。 112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如:生理盐水、营养琼脂等培养基用121℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112℃。 适用:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品。高压蒸汽灭菌器高温对培养基的影响及其防止措施B、煮沸消毒法 物品在水中煮沸15min,可杀死所有繁殖体和一部分芽孢。 在水中加入1%的Na2CO3或2-5%的碳酸钠效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。 C.间歇灭菌法:(fractionalsterilization) 方法:将待灭菌物品在80-100℃蒸煮15-60min,冷却后搁置室温(28-37℃)下过夜,并重复以上过程三遍以上。 应用:适用于不耐高温的物品灭菌,如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。缺点是麻烦、费时。D、巴氏消毒法(pasteurization) 是食品(牛奶)酿造(啤酒)工业中常用的方法。 低温长时法(Lowtemperaturelongtime,LTLT);63-65℃处理30min 高温瞬时法(Hightemperatureshorttime,HTST):71-72℃处理15s 超高温巴斯德灭菌法(Ultrapasteurization):让液体食品停留在132℃左右1-2s,急剧冷却至75℃,经匀质化后冷却至20℃。 1.Pasteurizedsterilizedfreshmilkline; 2.SuperhightempequipmentofSweden(二)低温对细菌的影响 二、干燥微生物对干燥的抵抗力与以下因素有关: 温度:在相同的干燥环境下,温度高,微生物易死亡, 而在低温下不易死亡(例如冷冻干燥保藏菌种) 干燥速度:干燥速度快,微生物不易死亡,反之,易死亡 基质:在不同基质中对干燥的抵抗力不同,含有糖、淀粉、蛋白质等物质时,不易死亡。 微生物种类及生长时期:产荚膜菌比不产荚膜菌抗性强;小型、厚壁细胞的微生物比长型、薄壁细胞的微生物抗性强;细菌的芽孢、真菌的孢子比营养细胞抗干燥性很强;老龄菌比幼龄菌抗性强。三、渗透压渗透压与溶质的种类及浓度有关: 溶质浓度高,渗透压大. 不同种类的溶质形成的渗透压大小不同,小分子溶液比大分子溶液渗透压大;离子溶液比分子溶液渗透压大;相同含量的盐、糖、蛋白质所形成的溶液渗透压为盐>糖>蛋白质。 对于一般