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细菌的分布(fēnbù)及外界因素对细菌的影响第一节细菌(xìjūn)的分布一、细菌(xìjūn)在人体的分布二、细菌(xìjūn)在自然界的分布(一)土壤中的细菌 土壤中的微生物以细菌为主,放线菌次之,另外还有真菌、螺旋体等 (二)水中的细菌 水中的病菌如伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体等主要来自人和动物的粪便及污染物。因此(yīncǐ),粪便管理在控制和消灭消化道传染病有重要意义。(三)空气中的细菌 室外空气中常见产芽胞杆菌、产色素细菌及真菌孢子等;室内空气中的微生物比室外多,尤其是人口密集的公共场所、医院病房、门诊(ménzhěn)等处,容易受到带菌者和病人污染。【目的】 通过实验掌握检测细菌分布的方法,熟悉正常(zhèngcháng)菌群的含义。 【材料】 普通琼脂平板培养基,血琼脂平板培养基,生理盐水,碘酊,75%酒精,无菌棉签。【目的】 通过实验掌握检测(jiǎncè)细菌分布的方法,熟悉正常菌群的含义。 【材料】 普通琼脂平板培养基,血琼脂平板培养基,生理盐水,碘酊,75%酒精,无菌棉签。【方法】 (一)空气中细菌的检查 1.分别在教室、厕所、食堂及无菌室中选择距地面约1米左右的一处桌面,将普通(pǔtōng)培养基揭开,暴露空气中10min后,再将平皿盖上。 2.置37℃培养箱24h,观察培养基中菌落的数目及菌落形态的特点,并任选一个菌落作革兰氏染色,镜检观察。(二)呼吸道细菌的检查 1.将血平板培养基打开,在距口腔10cm,面对培养基用力咳嗽3~5次,再盖上平皿。 2.用沾过生理盐水的棉签在咽喉处轻轻擦拭,即咽拭子,然后在血平板培养基上用平板分离化线法接种。 3.将上述两个培养(péiyǎng)板均置37℃培养(péiyǎng)箱24h,观察培养(péiyǎng)基中菌落的数目及菌落的形态特点。(三)皮肤表面细菌的检查(jiǎnchá) 1.将普通培养基分为三等份,将未洗的手指、用肥皂洗过的手指、经上碘酊+75%酒精处理的手指在培养基上轻涂。 2.将培养板置37℃培养箱24h,观察培养基中菌落的数目及菌落的形态特点。第二节外界因素对细菌(xìjūn)的影响一、物理(wùlǐ)因素(三)滤过除菌法 除菌滤器简称滤菌器,将液体或空气通过含有微细小孔的滤器,只允许小于孔径(kǒngjìng)的物体如液体和空气通过,大于孔径(kǒngjìng)的的物体不能通过。它们可用陶瓷、硅藻土、石棉或玻璃屑等制成。主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、支原体和细菌的L型。(四)超声与超声波 每秒钟超过200,000次振动的声波不被人耳感受,称为超声波。微生物对强度高的超声波很敏感。 (五)干燥 多数细菌的繁殖体在空气中干燥时很快死亡。有些细菌抗干燥力较强,尤其有蛋白质等物质保护时。 (六)低温 多数细菌耐低温。在低温状态下,这些(zhèxiē)细菌的代谢减慢,当温度如回升到适宜范围又能恢复生长繁殖,故低温常用作保存菌种。二、化学(huàxué)因素(一)化学消毒剂 (二)防腐剂 用于防腐的药物称为防腐剂。生物制剂(如疫苗、类毒素、抗毒素等)中常加入防腐剂,以防止杂菌生长(shēngzhǎng)。常用防腐剂有0.5%石炭酸、0.01%硫柳汞和0.1~0.2%甲醛等。 (三)化学疗剂三、生物(shēngwù)因素四、实验(shíyàn)【材料】 (1)大肠杆菌、枯草杆菌斜面培养(péiyǎng)物 (2)肉汤培养基 (3)接种环,酒精灯【方法】 (1)取肉汤培养管6支,平均分成3组 (2)每组分别接种大肠杆菌和枯草杆菌 (3)第一组经高压蒸气灭菌15min,第二组置100℃水浴中10min,第三组不作处理。 (4)将三组(sānzǔ)培养管均置37℃孵育,24h后观察。2.紫外线杀菌试验 【原理】 紫外线被DNA吸收后,使DNA两个相邻的嘧啶形成二聚体,DNA的复制被抑制,从而导致细菌(xìjūn)变异或死亡。【材料】 (1)大肠杆菌斜面(xiémiàn)培养物 (2)琼脂平板培养基 (3)接种环,酒精灯,无菌滤纸片【方法】 1.以密集划线法将大肠杆菌(dàchánɡɡǎnjūn)接种于琼脂培养基上。 2.将镊子浸酒精燃烧灭菌后取灭菌滤纸片一张,置于涂有细菌的平板培养基表面。 3.打开培养皿盖,置于紫外灯下一尺处直接照射30~60min 4.取出纸片,盖好平板盖,置37℃孵育,24h后观察。(二)化学(huàxué)因素对细菌的影响 【原理】 许多化学制剂具有抑制和杀灭细菌的作用,在实际应用中具有杀菌作用的化学制剂称消毒剂,只能外用,用于抑制细菌生长与代谢的制剂称防腐剂【材料】 1.2.5%碘酒,75%酒精,1%龙胆紫,5%石炭酸,84消毒液 2.滤纸片,固体(gùtǐ)平板,弯头镊子,