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仪器分析第二讲色谱原理固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚色谱法定义、实质和目的色谱法分类色谱法分类色谱法分类色谱法分类色谱法分类色谱法分类色谱法的特点色谱法原理一、色谱过程、分离原理及特点(二)色谱分离原理 色谱分离基于各组分在两相之间平衡分配的差异,平衡分配可以用分配系数和分配比来衡量二、基本类型色谱法的分离机制(一)吸附色谱法图示(二)分配色谱法图示(三)离子交换色谱法图示(四)空间排阻色谱法图示结论:三、分配系数与保留行为的关系3.分配系数K(平衡常数):指在一定温度和压力 下,组分在色谱柱中达分配平衡后,在固定相与 流动相中的浓度比(色谱过程的相平衡参数)4.分配比k 分配比又称容量因子,它是指在一定温度和压力下,组分在两相间分配达平衡时,分配在固定相和流动相中的质量比。即 k=组分在固定相中的质量/组分在流动相中的质量=ms/mm k值越大,说明组分在固定相中的量越多,相当于柱的容量大,因此又称分配容量或容量因子。它是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数。 k值也决定于组分及固定相热力学性质。它不仅随柱温、柱压变化而变化,而且还与流动相及固定相的体积有关。k=ms/mm=CsVS/CmVm 式中cs,cm分别为组分在固定相和流动相的浓度;Vm为柱中流动相的体积,近似等于死体积。Vs为柱中固定相的体积,在各种不同的类型的色谱中有不同的含义。 例如:在分配色谱中,Vs表示固定液的体积;在尺寸排阻色谱中,则表示固定相的孔体积。 分配比k值可直接从色谱图中测得 k=(tr–t0)/t0=tr/t0=Vr/V0 5.分配系数K与分配比k的关系 K=k. 其中β称为相比率,它是反映各种色谱柱柱型特点的又一个参数。例如,对填充柱,其β值一般为6~35;对毛细管柱,其β值为60~600。 讨论: 色谱条件一定时,tR主要取决K的大小 (色谱法基本的定性参数)结论:色谱分离前提→各组分分配系数不等气相色谱流程介绍二、气相色谱结构流程气相色谱流程介绍2.进样装置气相色谱流程介绍气相色谱流程介绍气相色谱流程介绍气相色谱流程介绍气相色谱流程介绍气相色谱流程介绍