氨基酸的分离鉴定.ppt

实验4氨基酸的分离鉴定－纸层析法层析法（色谱法）分配层析一、实验目的二、实验原理4.Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、PH层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。
5.上层层析、下层层析、单向层析、双向层析。三、仪器、材料和试剂四、操作步骤与方法1．将盛有扩展剂10ml的小烧杯和培养皿置于密闭的层析缸中。
2．戴手套取层析滤纸一张作标记。
3。点样：干后重复点一次，直径最大不超过3mm。缝成筒状，两边不能接触。点样面朝外，点样端朝下，盖上层析缸盖，平衡约20~30分钟。
4.展层用长颈漏斗，扩展剂的液面需低于点样线1cm。上沿约1厘米时，取出滤纸，用铅笔标出溶剂前沿界线，干燥。
5．显色用0.1%茚三酮丙酮溶液均匀浸透，烘箱（65℃）5分钟或用热风吹干。脯氨酸、羟脯氨酸产生黄色物质外，所有α－氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮产生兰紫色物质。
五、实验结果与讨论六、注意事项七、思考题