异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠.doc

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万真，等.异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠
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万真，等.异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠

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中国组织工程研究第17卷第53期2013–12–31出版
ChineseJournalofTissueEngineeringResearchDecember31,2013Vol.17,No.53

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.53.006[http://www.crter.org]
万真，张晓刚，郑幸龙，马锋，马佳，向俊西，王浩华，吕毅.异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠[J].
中国组织工程研究，2013，17(53):9132-9138.

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异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠**☆

万真1，2，张晓刚1，2，郑幸龙1，2，马锋1，2，马佳1，2，向俊西1，2，王浩华1，2，吕毅1，2(1西安交通大学第一附属医院肝胆外科，陕西省西安市710061；2西安交通大学先进外科技术与工程研究所，陕西省西安市710061)

文章亮点：
1实验行异种肝前体细胞移植，就其治疗急性肝损伤的作用，及移植细胞在大鼠脾脏内的植入和肝细胞分化做一探索。
2发现异种肝前体细胞移植能改善肝功能，促进肝细胞修复，移植的异种肝前体细胞能有效植入脾脏实质，并在脾脏微环境调控下向肝细胞分化。
关键词：
器官移植；细胞移植；肝移植；急性肝损伤；分化；植入；肝前体细胞；脾脏；Alb；CK-19；异种；微环境；国家自然科学基金
主题词：
细胞移植；脾；成体干细胞；细胞分化；细胞，培养的；四氯化碳
基金资助：
国家自然科学基金(30600575；30830099)资助**

摘要
背景：成体肝前体细胞可在受体肝脏内定植并分化为肝细胞。不过，异种肝前体细胞移植能否促进急性肝损伤的恢复，脾脏微环境能否促进移植物的存活和向肝细胞分化，尚没有研究。
目的：评价异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤的作用；监测移植肝前体细胞在大鼠脾脏实质内的定植及向肝细胞的分化。
方法：体外培养雄性小鼠来源的肝前体细胞系肝上皮样前体细胞。通过CCl4腹腔注射联合2/3肝切除构建急性肝损伤大鼠模型，进行肝上皮样前体细胞脾脏移植。在肝切除后1，5，14和21d，苏木精-伊红染色观察肝脏病理改变，全自动生化分析仪监测血清转氨酶变化，PCR反应检测脾脏组织Y染色体特异性序列Sry，脾脏CK-19和Alb免疫组织化学追踪移植肝上皮样前体细胞的植入和肝细胞分化。
结果与结论：肝上皮样前体细胞可在体外长期培养，保持增殖能力和双向分化潜能。肝上皮样前体细胞脾脏移植后，肝损伤大鼠肝细胞肿胀明显减轻，丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶下降更明显。移植后1，5，14和21d，脾脏DNA中均能检测到Sry序列。在整个实验期间CK-19阳性细胞在大鼠脾脏实质内始终存在。Alb阳性细胞在移植后5d在脾脏实质中出现，随后阳性细胞数逐渐增多。实验表明，移植肝前体细胞能在大鼠脾脏实质中植入，并分化为肝细胞，能有效促进CCl4腹腔注射联合2/3肝切除诱导的大鼠急性肝损伤的修复过程。

Intrasplenicdeliveryofxenogeneichepaticprogenitorcellsamelioratesacuteliverinjuryinrats

WanZhen1,2,ZhangXiao-gang1,2,ZhengXing-long1,2,MaFeng1,2,MaJia1,2,XiangJun-xi1,2,
WangHao-hua1,2,LüYi1,2(1DepartmentofHepatobiliarySurgery,FirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,ShaanxiProvince,China;2InstituteofAdvancedSurgeryTechnologyandEngineering,Xi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,ShaanxiProvince,China)

万真☆，男，1985年生，江西省南昌市人，汉族，西安交通大学医学部在读博士，主要从事肝干细胞和肝再生的研究。

通讯作者：吕毅，博士，教授，博士生导师，西安交通大学第一附属医院肝胆外科，陕西省西安市710061；西安交通大学先进外科技术与工程研究