2019108856944一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN110554201A
(43)申请公布日2019.12.10
(21)申请号201910885694.4G01N33/558(2006.01)
(22)申请日2019.09.19G01N33/543(2006.01)

(66)本国优先权数据
201910497830.22019.06.10CN
(71)申请人青岛海润检测股份有限公司
地址266000山东省青岛市黄岛区江山南
路458号创业大厦101室
(72)发明人刘刚梁德勇刘亚飞秦敬波
苗春雨
(74)专利代理机构北京天奇智新知识产权代理
有限公司11340
代理人陈岚崴
(51)Int.Cl.
G01N33/68(2006.01)
G01N33/569(2006.01)
权利要求书2页说明书4页附图1页
(54)发明名称
一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒
(57)摘要
本发明公开了一种检测猪伪狂犬病毒抗体
的试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明的检
测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒包括反应液和反
应装置两部分；本发明试剂盒可用于血清、血浆、
末梢血或静脉血中PRV-gE/gB抗体快速分析，具
有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势；具有良
好的稳定性、线性和准确性，可用于区分野毒感
染的同时监测疫苗抗体水平，具有良好的应用前
景。
CN110554201A
CN110554201A权利要求书1/2页

1.一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒，其特征在于：包括反应液和反应装置两部分；
所述反应装置包括顶部敞口的盒体(1)，盒体的敞口上扣装有扣罩(2)，扣罩(2)内安装试纸
板(3)且扣罩(2)倾斜设置，扣罩(2)的低端通过弹片(4)连接在盒体(1)上、扣罩(2)的高端
设置反应键(5)，扣罩(2)上在靠近反应键(5)的位置上开设加样孔(6)；所述试纸板(3)包括
PVC底衬板(7)、硝酸纤维素膜(8)、吸水垫(9)和样品处理垫(14)，硝酸纤维素膜(8)、吸水垫
(9)和样品处理垫(14)均粘贴在PVC底衬板(7)上且硝酸纤维素膜(8)位于中部、样品处理垫
(14)和吸水垫(9)分别搭接在硝酸纤维素膜(8)的高端和低端，硝酸纤维素膜(8)的中部平
行设有一条包被有猪伪狂犬病毒gE重组蛋白的检测线(L-T1)、一条包被有猪伪狂犬病毒gB
重组蛋白的检测线(L-T2)和一条包被有鼠抗羊IgG二抗的质控线(L-C)，扣罩(2)上开设有
正对硝酸纤维素膜(8)中部的观察窗(13)；盒体(1)的内部设置有试剂槽(10)，试剂槽(10)
位于PVC底衬板(7)贴有样品处理垫(14)一端的正下方，试剂槽(10)内盛装有反应液，试剂
槽(10)的开口上封装有密封薄膜(11)，PVC底衬板(7)的底面上连接有可在反应键按下时将
密封薄膜(11)刺破的钩刺(12)。
2.根据权利要求1所述检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒，其特征在于：所述样品处理垫
(14)包括经处理液处理后的全血滤膜和经红细胞单抗处理液处理后的玻璃纤维膜，玻璃纤
维膜设置于外层，全血滤膜设置于内层；所述玻璃纤维膜和全血滤膜于室温相对湿度不高
于30％的条件下密封干燥处理。
3.根据权利要求2所述检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒，其特征在于：所述处理液为含
有0.1-1％Tween-20、0.1-5％BSA和0.5-2％阻断剂的0.02M、pH7.0-8.0的Tri-Cl缓冲液；所
述红细胞单抗处理液为含有0.1-1％Tween-20、0.1-5％BSA和0.5-5mg/mL抗-Hb单抗的
0.02M、pH7.0-8.0的Tri-Cl缓冲液。
4.根据权利要求1所述的猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒，其特征在于：所述检测线L-
T1、检测线L-T2和质控线L-C由喷膜仪以1-2μL/cm喷速、0.5cm间距在硝酸纤维素膜上平行
划线形成，喷膜仪用到的溶液分别为猪伪狂犬病毒gE重组蛋白溶液、猪伪狂犬病毒gB重组
蛋白溶液和鼠抗羊IgG二抗溶液；其中，所述猪伪狂犬病毒gE重组蛋白溶液、猪伪狂犬病毒
gB重组蛋白溶液和鼠抗羊IgG二抗溶液为猪伪狂犬病毒gE重组蛋白、猪伪狂犬病毒gB重组
蛋白和鼠抗羊IgG二抗分别用0.02M、pH7.0的Tri-Cl缓冲液配制成的1-2mg/mL的包被溶液，
喷线后的硝酸纤维素膜于室温相对湿度不高于30％的条件下干燥、密封保存。
5.根据权利要求1～4任一项所述猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒，其特征在于：所述试
剂槽中反应液的制备方法，包括如下步骤：
步骤1)取荧光微球经4000rpm离心30min，收集沉淀，用0.01M、pH5.0的硼酸盐缓冲液重

悬，调整微球浓度为OD450＝0.2，每毫升荧光微球重悬液分别加入浓度为10mg/mL