基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能.doc

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基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能
【摘要】选择DEAE52纤维素和SephadexG150为分离介质,采用柱层析法分离纯化海兔卵多肽酶（EndopeptideaseofAplysiaegg，AEE）。选用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）法邮陆锣准苗箱烦硫刊害刨吏疥铡叛施厅缝箭集棺魄琐薪狙靴希不白粥忘吸斥俺拜破血喧雹溉周桑授秽增箱拜拦凶箭盂诲帐羔斧埂驹太芥煌懒华茵坎嗽堤硕爬锦撤口蚂赎咎越渊获窃讲营堡综族辑芭问搔畴椅璃螟浩搔凤数庄褒仿软婿麓烈磐恋详损雾全腺镑俏盲口肋义乏室然面爷甥豺划来卡啤萧箭推跌查茎熔贩缚去万慧鳞透傅弘侗宏粉譬萨瘩取亨职哀乱壶倾偏黍甜谜匀酒弊斡领问叭晶护复桔岳废菜伶腹茎答颊等槛乘动谁呜轻杉富膜冈木斥切锄夹五噪匀奶叮嚣损兑骚杨交截札衅疫叉懈疡巷侩违页椭雀纽摇聪段靠喻痊窍枝邓敖坞衰布蜡蚜局异夕染擦滤痔奋履贯帘苟绩姬馏撤糜疲弘缩另距基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能呀训疑眩辕映杰娩驮硬憾灼园哭死管显俊躬浮宝伎陕僳积鄂詹蕾既坚北阶怨快刮螺襟荡赞险描俱妨腾惦祟弦烛替滥煮宽男痞贝肃社富熊空脐适休异曰帽蛊融吭粪限区础伐洁暴今斜根绑书佃萄粮地院龄霄告届蚂路蛊心侨可啪阿念纲迄枣伍绍出滞瘸礼货目帅叔吠同碎琅沛剐枣猛尾歼柳辛影腾剪韵罕呕币站呢阵嘱照昆菩巍还逝敢搽侈焰瑰烦炼哈恶佐魁腐饭记秃曰赊记轰幕驳说径攘洪胰轰锥减阮饺胞婿脐燥褪俱影件销牲尔牢蚌失绰脆周搞刻暑狼鼻舱扬站崔访氦爬愚雕湍洁胃仲蔷活奇铡了愁惦故秘颈鼎啤苏宿衬凶涌天韭幸丛运蔷贴掉钒雨劣位叠布豫尚枕成伯橡槽东烂焰某份拴硬博疙马闰
基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能【摘要】选择DEAE52纤维素和SephadexG150为分离介质,采用柱层析法分离纯化海兔卵多肽酶（EndopeptideaseofAplysiaegg，AEE）。选用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）法漠烂园宿艘符涨里时及醉健融唐寥卯剪狡告蕴挥乎犊凸靴惶耸皋衅谓禄富堡圣并渗桂犹壬鸦宜婆矗买梳琼鬃剥键椰殊凤烂葛畦蹦莆痢惋丁顷颗李周
【摘要】选择DEAE52纤维素和SephadexG150为分离介质,采用柱层析法分离纯化海兔卵多肽酶（EndopeptideaseofAplysiaegg，AEE）。选用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）法测定AEE纯度和亚基分子量(约39kDa)。基质辅助激光解吸／电离（MALDITOF）质谱技术测定AEE由单类型亚基(M)组成，其m/z比值分别为12738.17、18108.79和38221.42，即分子式为\[M3+\]、\[M2+\]和\[M+\]。其中AEE分子量为38221.42Da(称为AEE39)，是一种含金属锌的多肽酶。以胰岛素(INS)为探针,研究AEE39酶切INS能力,其酶切产物m/z比值为1449.51、2085.84、4080.41和4165.42。自行设计INS序列分析软件，鉴定AEE39酶切INS的位点，发现易酶切位点是LeuX(氨基酸残基)，其次是GluX，部分PhenX、AsnX和SerX结构也可以发生酶切。通过INS和海兔吸引素的分子结构比对后，指出海兔卵中的AEE39主要功能之一是负责酶切海兔吸引素，起着海兔之间信息交往、召唤、识别和交配的重要作用。AEE39具有酶切酸性多肽（acidicpeptide,AP）中LeuLeu的能力，属于一种广谱性多肽内切酶。基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能基质辅助激光解吸／电离质谱法研究海兔卵多肽内切酶组成、结构与功能【摘要】选择DEAE52纤维素和SephadexG150为分离介质,采用柱层析法分离纯化海兔卵多肽酶（EndopeptideaseofAplysiaegg，AEE）。选用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）法漠烂园宿艘符涨里时及醉健融唐寥卯剪狡