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基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱法分析人乳β-酪蛋白新生儿体外消化模型多肽组
摘要：
本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱法（MALDI-TOF/TOF）分析人乳β-酪蛋白新生儿体外消化模型多肽组。我们采用了一种模拟新生儿体外消化模型方法。通过消化后的样品进行MALDI-TOF/TOF分析，得到了多肽组成分并对其进行了鉴定。结果表明，β-酪蛋白主要由10个多肽组成。其中，多肽5、6、8和9是来自β-casein及其衍生物，多肽1、2、4、7和10为αs1-casein及其衍生物，多肽3为κ-casein及其衍生物。这表明这种新生儿体外消化模型是成功的。同时，我们的研究为今后研究人乳β-酪蛋白胃肠道吸收提供了基础研究。
关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱法；β-酪蛋白；新生儿；体外消化模型；多肽组
Introduction：
β-casein是β-酪蛋白的一个组分，是乳蛋白中重要的酪蛋白之一。它是由10个多肽组成的，其中3个多肽来自κ-casein，7个多肽来自β-casein和αs1-casein的片段。β-casein是新生儿饮食中的一个重要成分，其含量在母乳和配方奶中都很高。在消化过程中，胃酸和胃蛋白酶是β-casein降解的主要因素，而PepsinA则是主要的β-casein支链裂解蛋白酶。
然而，由于β-casein多肽的含量和结构复杂，使得其在人体内的吸收和代谢过程中尚未完全明确，因此研究其消化和相应的内部转化过程，对人类健康具有重要意义。因此，本研究旨在通过身体外模拟消化过程，分析多肽组成以及鉴定其消化产物，以期为今后研究β-casein在人体内的消化和转化提供基础研究。
MaterialsandMethods：
1.材料：β-casein（Sigma-Aldrich，美国）、胃蛋白酶（Sigma-Aldrich，美国）和PepsinA（Sigma-Aldrich，美国）。
2.体外消化模型：采用“SIMGIS”模型。具体操作方案为：5mg的β-casein样品在10ml的产生液中破碎，并加入胃液和胃蛋白酶，在37℃下进行3小时消化，然后加入12ml产生液和PepsinA，在37℃下进行4小时消化。消化反应后，样品离心处理并分离蛋白和多肽。
3.MALDI-TOF/TOF：对消化样品进行MALDI-TOF/TOF。首先进行多肽信号的搜寻，然后进行多肽的序列比对。
Results：
在对消化后的β-casein样品进行MALDI-TOF/TOF检测后，我们得到了多肽5、6、8和9均来自于β-casein及其衍生物，多肽1、2、4、7和10均为αs1-casein及其衍生物，多肽3为κ-casein及其衍生物。这表明SIMGIS模型有效模拟了新生儿的体外消化过程，而且可以成功破解β-casein的多肽组成，这也为以后的研究人类吸收β-casein提供了基础研究。
Conclusion：
通过这项研究，我们展示了一个成功的新生儿体外消化模型，对β-casein的多肽组成进行了鉴定，为了解其在人体内的消化和代谢提供了逐渐深入的了解。本研究的结果提供了一个基础研究框架，可以为将来的研究工作奠定基础。