裸鼠荷瘤方法及注意事项.doc

关于肿瘤细胞株的选择，确实是一个很麻烦的问题，各类文献中提到过的细胞株有很多，但是一般而言，我觉得，对于我们做裸鼠肿瘤模型，细胞株的选择应该考虑一下几个方面：1.国际公认度，虽然SFDA的指导原则上表示只要是建株细胞株均可以，但是一般来说，还是应该尽量考虑国际上比较公认的细胞株。2.体内生长情况，很多细胞株，在文献中有很高的出镜率，但是实际上，基本都是从体外开始有名，所以很多人就硬生生的往体内套，结果就是吃力不讨好，比如楼主提到的A549，还有MCF-7，都是很有名气的细胞株，但是在体内却不是一个好的试验对象，成瘤率低，生长慢，均一度差。现在国内的很多研发单位，特别是一些公司的领导们，缺乏这方面的认识，动不动就把这些著名的细胞株挂在嘴边，硬压着一线的研究人员去花功夫做这些细胞株，作的不好，就怀疑大家的水平如何如何的，奶奶的，对此非常生气！3.药物的敏感性，这一点常常被大家忽视，大部分的裸鼠肿瘤模型都是为抗肿瘤药物的筛选以及研究服务的，但是常常大家只考虑了这个细胞株是不是好做，但是没有考虑到细胞株本身对于药物的敏感性，比如Lovo细胞，国际公认度也还可以，体内生长情况也很棒，但是对于药物的敏感性不佳，大部分的常规化疗药物到了它这里，抑瘤率都会下降，显而易见，对于抗肿瘤药物的筛选来说，它不是一个好的选择。另外说一点，体内与体外的关系，现在做体内的人，常常被体外的人牵着鼻子走，体外做出来什么什么细胞株敏感，体内的人就得吭哧吭哧的去做这个，但是却死活做不好，其实，现在我和一些老前辈们的观点是，体内和体外应该协调好细胞株的选择问题，体外的人手上有大把的细胞株可以选择，如果，体内的人不去和他们协调，那么将永远被牵着鼻子走，受累还不讨好，应该大家坐下来，一起选择20~30种细胞株作为常规的筛选细胞株，这就足够了，细胞株选择的时候考虑好方向（胃癌、肝癌、肺癌什么的）、靶点（EGF、vEGF等等），不能漫无边际的抓着哪个体内就的做哪个，谁也没有这个本事啊。以下给出一些细胞株供大家参考：头颈部肿瘤没有特别好的细胞株，Hep2（喉癌）、CNE（鼻咽癌）凑活，比较慢，但是可以接受。肺癌不要和我提什么A549，不好伺候，NCI-H460（大细胞肺癌）还不错，生长速度快，成瘤率好，但是技术不好的话，均一度会差一些，水平过关的话，开始试验的时候SD应该为平均值的1/3，对药物很敏感，特别是紫杉醇，非常敏感。SPC-A-1（肺腺癌），马马虎虎过得去，速度不是很快，但是也还能接受。胃癌MNK-45，日本细胞株，公认度也可以，比较好。BGC-823，很好的公认度，生长有些慢。食道癌Eca-109，我们找不到其他的东西，只能用它，一般般，有点不好伺候。前列腺癌PC-3、DU-145，都是不错的细胞株，用它们没错的。结肠癌HT-29吧，生长还可以，Lovo对药物的敏感性差了点。肝癌这个是比较头痛的一个领域，Bel-7402，SMMC7721只能说凑活，还有国内自己建株的QGY生长特性不错，但是公认度差了点。白血病我自己都没有做出来过，嘿嘿，K562和HL60都不好整。表皮癌A431，这家伙，棒极了，在我手上，每次试验只需要淘汰一两只，剩下的SD小于平均值的1/4，我很喜欢它，主要是EGFR高表达，做这方面的药物，少不了它！乳腺癌不要用MCF-7,MDA-MB-435、MDA-MB-468、Bcap-37都不错，其中Bcap-37也是EGFR高表达。卵巢癌SK-ov-3不错的。宫颈癌比较麻烦，Hela细胞株自身的生长特性就不佳，另外安全性方面也很不好，女生勿近，我们以前做过一个C33A，还可以，对药物很敏感，生长比较慢，成瘤率也偏差，用的人也不多，但是没有办法阿。想起来的就这些，剩下的大家补充吧。

二、
1.裸鼠的状态裸鼠的年龄，比如5-7ｗ比9ｗ容易成瘤，因为这时免疫系统不够强；或者如果裸鼠由于试验系统染菌而长毛或感染，则成瘤率可能会受影响2.细胞接种量动物肿瘤一般接种2～600万/只就100%成瘤，而人癌则需要1000万以上才能较高的成瘤3.细胞状态肿瘤细胞的活力，生长状态，是否对数生长期，有无污染也对成瘤影响很大

三、接种量
要查文献来确定接种量，在找不到任何相关资料的情况下，最高就用到1*107/0.2ml/site,再高也没有意义了。如果你的细胞很小，1*107/0.1ml也可以操作，不至于很粘稠，那么最好是1*107/0.1ml/site。查文献看他们的构建条件是什么样的，比如培养条件，接种量，接种位置什么的，是不是一定要用雌性鼠等等。
有的瘤株也有可能很容易成瘤，而且生长速度很快。建议用几只动物试试不同的接种浓度，万一能够长出来，而且还长得很快，那你就要根据情况选择一个合适的浓度了。基本上一般认为比较合适的接种浓度有这么几个特征：1.接种后10到15